[发明专利]降低PSMD12基因表达的siRNA、重组载体及其应用

说明书

本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，涉及一种降低PSMD12基因表达的siRNA、重组载体及其应用。具体地，涉及一种siRNA，所述siRNA特异性地降低PSMD12基因表达。由于本发明提供的siRNA能够特异性地降低PSMD12基因表达，使得该siRNA可应用于制备治疗和/或预防乳腺癌的药物。

技术领域

本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，更具体地，涉及一种降低PSMD12基因表达的siRNA、所述siRNA对应的shRNA，编码所述shRNA的DNA，包括该DNA的重组载体，包括该重组载体的重组慢病毒，包括所述siRNA、shRNA、编码shRNA的DNA、重组载体和重组慢病毒的宿主细胞，以及它们的应用。

背景技术

乳腺癌是世界范围内女性常见的恶性肿瘤之一，其新发率和死亡率位居各类癌症首位。尽管我国乳腺癌发病率相对较低，但人口基数大，总体发病人数多，发病率有逐年上升的趋势，且发病年龄呈年轻化趋势。乳腺癌在细胞起源、组织学形态、疾病分级、临床表现、治疗反应以及转移潜能等方面都表现出极大的复杂性与异质性，限制了现有乳腺癌治疗方法的有效性和广泛性。临床上仍然缺乏乳腺癌治疗的靶点。

PSMD12(26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基12，proteasome 26S subunit,non-ATPase12，PSMD12)编码基因定位于17q24.2，具有13个外显子。PSMD12蛋白细胞定位较为广泛，位于细胞外、细胞核和细胞质等部位。PSMD12是26S蛋白酶体成分之一，参与ATP依赖性泛素化蛋白降解过程。该蛋白酶体通过去除可能损害细胞功能的错误折叠或者受损蛋白以及失去功能的蛋白，维持蛋白质稳态。蛋白酶体参与许多细胞过程，包括细胞周期进程、细胞凋亡或DNA损伤修复。

发明内容

本发明的目的是提供针对降低PSMD12基因表达的siRNA，所述siRNA对应的shRNA，编码所述shRNA的DNA，包括该DNA的重组载体，包括该重组载体的重组慢病毒，包括所述siRNA、shRNA、编码shRNA的DNA、重组载体和重组慢病毒的宿主细胞，以及它们的应用。

为了实现上述目的，本发明的第一方面提供一种siRNA，所述siRNA特异性地降低PSMD12基因表达。

本发明的重点在于提供新的乳腺癌治疗靶标，而不限于具体的siRNA序列，可以根据本领域常规的各种方法设计针对该靶标的siRNA。所述siRNA通常具有19～27bp的核苷酸序列。

具体地，所述siRNA的核苷酸序列至少包括以下一组核苷酸序列：

(1)第一组核苷酸序列

所述第一组核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述SEQ ID NO:1为5'-GCCAAGUAUUAUACUCGGAUA-3'，所述SEQ ID NO:2为5'-UAUCCGAGUAUAAUACUUGGC-3'；

(2)第二组核苷酸序列

所述第二组核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示，所述SEQ ID NO:3为5'-CCUUCCUAUCAAACUUCGAUU-3'，所述SEQ ID NO:4为5'-AAUCGAAGUUUGAUAGGAAGG-3'；

(3)第三组核苷酸序列

所述第三组核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示，所述SEQ ID NO:5为5'-CCGAAUAAGUGGUGACAAGAA-3'，所述SEQ ID NO:6为5'-UUCUUGUCACCACUUAUUCGG-3'。

本发明第二方面提供一种shRNA，其为具有茎环结构的单链RNA，所述shRNA的核苷酸序列至少包括以下一组核苷酸序列：

(1)第五组核苷酸序列