[发明专利]基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器和检测方法有效
申请号: | 201910189281.2 | 申请日: | 2019-03-13 |
公开(公告)号: | CN109975272B | 公开(公告)日: | 2021-11-16 |
发明(设计)人: | 邵昊华;董文飞;梅茜;李力;葛明峰;常智敏 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G01N21/66 | 分类号: | G01N21/66 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 韩飞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 化学 发光 能量 转移 多巴胺 检测 传感器 方法 | ||
1.一种基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,该传感器通过先在电极表面修饰CNT-AuNP和H-g-C3N4,然后滴加氨基修饰的DNA-1,使DNA-1通过酰胺键与电极结合,最后加入连接有DNA-2的金纳米簇得到,其中,所述H-g-C3N4为碱水解g-C3N4,DNA-1与DNA-2互补配对。
2.根据权利要求1所述的基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,所述传感器的制备方法具体包括以下步骤:
1)制备H-g-C3N4;
2)制备CNT-AuNP;
3)制备金纳米簇;
4)电极修饰:在电极表面依次修饰CNT-AuNP和H-g-C3N4后,再将金纳米簇修饰在电极表面,得到用于检测多巴胺的传感器。
3.根据权利要求2所述的基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,所述步骤4)包括:先将CNT-AuNP滴加在预处理后的电极表面,干燥后滴加H-g-C3N4,干燥后再滴加EDC/NHS,然后滴加氨基修饰的DNA-1,使DNA-1通过酰胺键与电极结合,最后加入连接有DNA-2的金纳米簇,其中,DNA-1与DNA-2互补配对。
4.根据权利要求3所述的基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,所述步骤1)具体包括:将30mg g-C3N4和2.5gNaOH溶于25mL水中,超声1.5h使其分散充分,然后在65℃下搅拌过夜,之后补加1.0gNaOH,再超声2h;将得到的溶液转移到透析袋中,溶液透析持续48小时,每12h换一次水,以除去NaOH,完成后取内液转移至离心管,6500rpm下离心15min,除去颗粒和大片层,保留上清液,得到H-g-C3N4水溶液。
5.根据权利要求4所述的基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,所述步骤2)具体包括:
2-1)以氯金酸溶液和柠檬酸钠为原料制备胶体AuNP;
2-2)PDDA功能化CNT的制备:将CNT分散在超纯水中,浓度为1.0mgmL-1,使用体积比为3:1的硫酸、HNO3混合液对其进行超声波处理2h,以获得羧基官能化CNT;然后,将1.0mL羧基官能化CNT溶液分散到5mL的1wt%PDDA水溶液中,并进行超声处理1h,以获得均匀的CNT;之后通过16000rpm离心15min,去除残留的PDDA,用超纯水洗涤沉淀3次,得到PDDA功能化CNT;
2-3)将1.0mL PDDA功能化CNT分散到5.0mL制备好的胶体AuNP中并超声处理10分钟,16000rpm离心10min,获得CNT-AuNP复合材料,再用水冲洗,制成1.0mg/mL的水溶液。
6.根据权利要求5所述的基于电致化学发光能量转移的多巴胺检测传感器,其特征在于,所述步骤3)具体包括:将0.15mL 100mM谷胱甘肽溶液加入洁净的样品瓶,用超纯水稀释至5mL,剧烈搅拌下,加入0.5mL 20mM的氯金酸溶液,在70℃恒温水浴锅中反应24h,反应完成后,自然冷却至室温,透析48h除去未反应杂质,冻干保存。
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