[发明专利]一种获得基因编辑绵羊的方法及其专用sgRNA和Oligo DNA有效
| 申请号： | 201910187375.6 | 申请日： | 2019-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN110129320B | 公开（公告）日： | 2020-04-17 |
| 发明（设计）人： | 周平;李伟;周琪;王立民;曲彬;唐红;许凯;郭延华;张译元 | 申请（专利权）人： | 新疆农垦科学院;中国科学院动物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/90 |
| 代理公司： | 苏州吴韵知识产权代理事务所(普通合伙) 32364 | 代理人： | 朱亮 |
| 地址： | 832000 新疆维吾尔自*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 获得 基因 编辑 绵羊 方法 及其 专用 sgrna oligo dna | ||
1.能够特异的靶向修饰绵羊FecB基因的系统，其特征在于：包括两个sgRNA和三个Oligo DNA序列，其中，两个所述sgRNA为sgRNAFecB-1和sgRNAFecB-2，包含序列表的序列3和4的核苷酸所示的RNA；三个所述Oligo DNA序列为序列表的序列5、6和7或具有该序列的DNA。
2.如权利要求1所述的能够特异的靶向修饰绵羊FecB基因的系统，其特征在于 ：所述Oligo DNA为序列表的序列5-7所示的DNA。
3.编码权利要求1中所述sgRNAFecB-1和所述sgRNAFecB-2的DNA分子。
4.如权利要求3所述的DNA分子，其特征在于 ：编码权利要求1中所述sgRNAFecB-1的DNA分子包含序列表的序列2自5’末端第885至904位核苷酸所示的DNA分子；编码权利要求1中所述sgRNAFecB-2的DNA分子包含序列表的序列2自5’末端第857至876位核苷酸所示的DNA分子。
5.一种能够特异的靶向修饰绵羊FecB基因的靶向序列，其特征在于：具有序列表的序列3或4所示核苷酸。
6.一种特异性编辑绵羊FecB基因的成套核酸分子，其特征在于：包括权利要求1或3所述的 sgRNA和Cas9 mRNA。
7.一种特异性编辑绵羊FecB基因的成套核酸分子，其特征在于：包括权利要求3或4所述的DNA分子。
8.一种特异性编辑绵羊FecB基因的方法，其特征在于：将权利要求1或6所述的sgRNA、权利要求1所述的Oligo DNA和权利要求6所述的Cas9 mRNA共转染绵羊细胞，从而编辑绵羊FecB基因。
9.如权利要求8所述的特异性编辑绵羊FecB基因的方法，其特征在于：所述共转染的方式为共注射，所述绵羊细胞为绵羊受精卵单细胞。
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