[发明专利]针对人血管平滑肌细胞L型钙通道和血管紧张素1型受体的嵌合型二价降压疫苗及其应用

说明书

本发明公开了一种针对人血管平滑肌细胞L型钙通道和血管紧张素1型受体的嵌合型二价降压疫苗及其应用，它包括由180个或者240个重组乙肝核心蛋白单体分子自我组装形成的二十面体病毒样颗粒，所述重组乙肝核心蛋白单体分子以免疫原性载体为骨架+高血压发病相关靶分子表位组合。本发明根据乙肝核心抗原的分子结构及免疫学特性，结合目前高血压疫苗研制的实际缺陷，设计出了一种针对多靶点的治疗性降压疫苗，该疫苗能诱导产生分别针对多种治疗性靶点的特异性抗体，发挥联合降压效应，有效降低了高血压动物模型的血压。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种针对人血管平滑肌细胞L型钙通道和血管紧张素1型受体的嵌合型二价降压疫苗及其应用。

背景技术

高血压是最常见的慢性疾病，目前已经成为心血管疾病、慢性肾脏疾病和糖尿病的首要危险因素，其脑卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性肾脏病等主要并发症，不仅致残、致死率高，而且严重消耗医疗和社会资源，给家庭和国家造成沉重负担。在最近数十年，我国高血压患病人数急剧增加，目前中国高血压患病率25.2％，全国已有2.7亿高血压患者(2014年)。虽然血管紧张素II受体阻断剂、血管紧张素转换酶抑制剂以及钙拮抗剂等化学药物已经在临床广泛使用并且展现出良好的疗效，但是由于这类化学药物往往需要每天服药甚至终身服药，因此化学药物的治疗依从性不佳，这也导致目前我国高血压人群的血压控制率仅为8％，远远落后于美国(35％)、加拿大(66％)等欧美发达国家。

与传统化学药物相比，疫苗接种能够诱导针对高血压相关靶分子的特异性抗体，减少给药频率，从而为当前的困境提供一种可能的解决方案。目前研究中的高血压疫苗主要针对肾素-血管紧张素系统，且多为针对单一靶点的疫苗。瑞士Cytos公司研制的针对血管紧张素II的CYT006-AngQb疫苗被认为是极有希望的降压疫苗。但是在后续临床试验中，与安慰剂组相比，该疫苗将受试者的日间平均动态血压从基线水平下调-9/-4mm Hg，这一降压幅度还不能完全满足临床实际要求。据分析，这种情况可能是由于三个方面的因素导致：

首先，针对血管紧张素II疫苗免疫会诱导肾素-血管紧张素系统反馈激活，这可能在一定程度上削弱了疫苗的降压效应；

其次，原发性高血压基本上是多种因素的联合作用效果，而实际上针对多个靶点的联合用药往往能获得更佳的预后效果。该疫苗仅针对单一靶点，可能导致无法获得理想的疗效；

最后，CYT006-AngQb疫苗作为一种化学偶联疫苗，其疫苗载体颗粒表面展示的血管紧张素II表位密度不足，载体蛋白表位大量暴露于机体免疫系统，导致该疫苗主要诱导产生的是针对载体颗粒的抗体，而不是期待的针对RAS系统成分血管紧张素II的抗体，这可能进一步制约疫苗的疗效。

发明内容

本发明的目的在针对现有的血管紧张素II的治疗性高血压疫苗面临单一靶点、肾素-血管紧张素系统反馈激活、以及疫苗载体的抗体滴度过高等问题，提供了一种针对人血管平滑肌细胞L型钙通道和血管紧张素1型受体的嵌合型二价降压疫苗。

为实现上述目的，本发明所设计一种针对人血管平滑肌细胞L型钙通道和血管紧张素1型受体的嵌合型二价降压疫苗，其特征在于：所述嵌合型二价疫苗包括由180个或者240个重组乙肝核心蛋白单体分子自我组装形成的二十面体病毒样颗粒，

所述重组乙肝核心蛋白单体分子以免疫原性载体为骨架+高血压发病相关靶分子表位组合，即为：

将高血压发病相关靶分子表位组合的氨基酸序列插入在免疫原性载体氨基酸序列中第76至82位氨基酸之间任意一个位点中，

或者，将高血压发病相关靶分子表位组合替换免疫原性载体氨基酸序列中第76至82位氨基酸之间的一段任意长度的氨基酸序列；

其中，免疫原性载体的氨基酸序列如SEQ ID No.1，高血压发病相关靶分子表位组合的氨基酸序列含有两种高血压发病相关靶分子表位的氨基酸序列。