[发明专利]评估慢性淋巴细胞白血病预后的组合试剂及系统

权利要求书

1.一种评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，包括：

数据获取模块，获取以评估慢性淋巴细胞白血病预后的组合试剂染色的待测细胞的流式细胞术检测结果数据；

数据分析模块，对上述获取的数据进行分析，根据预定的判断标准评估慢性淋巴细胞白血病预后；分析时，通过CD45-SSC设门，以淋巴细胞区域的细胞群为目的细胞群进行分析，所述目的 细胞群中各荧光抗体通过抗体对方式表达，所述抗体对选自：CD19-CD5，CD3-IgG1，CD3-ZAP70，CD19-IgG1，CD19-ZAP70，CD19-CD38和CD19-CD49d；

所述评估慢性淋巴细胞白血病预后的组合试剂包括以下抗体组合：

抗体组合1，包括CD5、IgG1、CD3、CD19和CD45抗体；

抗体组合2，包括CD5、ZAP70、CD3、CD19和CD45抗体；

抗体组合3，包括CD38、CD49d、CD19、CD5和CD45抗体；

所述抗体组合以CD45-SSC设门，按照以下抗体对表达进行细胞群分析：

CD19-CD5，CD3-IgG1，CD3-ZAP70，CD19-IgG1，CD19-ZAP70，CD19-CD38和CD19-CD49d。

2.根据权利要求1所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，所述抗体标记不同的荧光标记。

3.根据权利要求2所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，所述荧光标记选自：FITC、PE、ECD、PE-Cy^TM 5、PE-CY7、PerCP-Cy^TM 5.5、APC、APC-H7、APC-Cy7、APCAlexa Fluor 750、Pacific Blue^TM、V450、V500、Pacific Orange^TM、Krome Orange。

4.根据权利要求3所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，所述抗体组合中的各抗体的荧光标记分别选自：FITC、PE、ECD、PE-Cy^TM 5、PE-CY7。

5.根据权利要求1所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，还包括检测模块，所述检测模块对待测细胞进行流式细胞术检测，包括：

细胞准备模块，用以制备单细胞悬液，固定细胞后对细胞进行透膜处理，得到处理后细胞；

孵育模块，用以将处理后细胞与所述的组合试剂中的抗体组合1和抗体组合2分别进行孵育，并同时取单细胞悬液，与所述的组合试剂中的抗体组合3进行孵育；

重悬模块，用以向上述经孵育的细胞中加入溶血素、离心、洗涤后重悬；

测定模块，用以对上述重悬后的细胞进行流式细胞术测定。

6.根据权利要求1或5所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，所述数据分析模块执行以下流程：

获取流式细胞术检测结果数据，以CD45-SSC设门，并根据CD45的表达情况将细胞群分为粒细胞区域、单核细胞区域、淋巴细胞区域、CD45弱阳性区域和CD45阴性区域，圈出目的细胞群，再对目的细胞群进行分析。

7.根据权利要求6所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，所述预定的判断标准为：

在确诊为CLL的样本中，选择CD19-CD5表达均为阳性的细胞群，作为目的细胞群；

将CD19-ZAP70表达高于CD19-IgG1表达定义为CD19-ZAP70阳性：

如CD19-ZAP70阳性表达≧20％，则判定为与较快的疾病进展相关；

如CD19-CD38阳性表达≧30％，则判定为与预后较差相关；

如CD19-CD49d阳性表达≧30％，则判定为与预后较差相关。

8.根据权利要求7所述的评估慢性淋巴细胞白血病预后的系统，其特征在于，以CD3-IgG1表达作为CD19-ZAP70表达的阴性对照，以CD3-ZAP70表达作为CD19-ZAP70表达的阳性对照。