[发明专利]一种动物红细胞保存液的配制方法及其应用

说明书

本发明公开了一种动物红细胞保存液的配置方法及其应用，其特点是该红细胞保存液由ATP与谷胱甘肽、柠檬酸钠、葡萄糖、柠檬酸、磷酸二氢钠、甘露醇和去离子水按1：1：80~100：110~130：12~20：15~22：16~25：545~565摩尔比配制，经0.22μm的滤膜过滤，制得动物红细胞保存液，该保存液作为试剂用于骆驼科动物临床红细胞的输注和体外保存的体积比为1：1.5~2.5。本发明与现有技术相比具有体外有效动物红细胞达30天，可用于骆驼科动物临床红细胞的输注，配置方法简单，试剂材料易得，是一种高效、经济且符合能源资源节约的绿色制备方法。

技术领域

本发明涉及红细胞保存技术领域，具体地说是一种骆驼科动物红细胞保存液的配制方法及其应用。

背景技术

骆驼科动物作为经济动物有一定范围的饲养规模，骆驼科动物中部分种如野骆驼为濒危野生动物，在对濒危物种急救及经济动物兽医救治过程中，输血疗法是重要的手段，但目前尚无针对骆驼科动物的红细胞体外保存液。人类红细胞寿命大约为120天，受损或衰老的红细胞的膜脆性增加，致使抗原暴露，暴露的抗原与自身IgG结合，最终被巨噬细胞吞噬。另外，红细胞老化致使表面CD47含量下降，也会导致红细胞被吞噬。由于老化红细胞易被吞噬清除，故而对于如何更好的保存红细胞以满足输血治疗的目的，是输血医学中一直不断探索的问题。

红细胞输注的目的是输送具有正常生物功能的红细胞进入受血者体内，减轻或治疗受血者因缺乏红细胞或缺乏具有正常生物功能的红细胞造成的症状。日常输血中最常用的红细胞体外保存方法是4℃保存，不同的配方及添加剂决定了红细胞保存时间的长短。由于红细胞在保存期间持续代谢，所以红细胞4℃体外保存只能起到短时体外保存的作用。临床上对体外保存后的红细胞输注效果的评判标准是输注后24h输注的红细胞成活率应高于70％(Pittiglio DH，1983)，而实验中评价红细胞保存效果最常用的是细胞形态学外观、游离血红蛋白/溶血率及ATP三类指标(Pittiglio DH，1983；Hess JR，2002)。

红细胞在保存期间，随时间变化，其形态学发生较大变化，如皱缩、出脊等，故形态学观察可直接评价细胞保存体系的优劣，游离血红蛋白/溶血率作为通过肉眼可以观察到的最直观的指标，是一个红细胞保存体系好坏的直接评价。体外保存红细胞发生溶血后，输血过程中大量游离血红蛋白进入机体，会诱发黄疸，还导致脑部缺氧，过多的血红蛋白代谢还会导致肾脏疾病(Heaton WA，1992；CF，1999)。ATP是红细胞保持正常生理功能的基础。1983年Pittiglio发现，红细胞内ATP含量与输注后24h红细胞成活率有直接关系(Pittiglio DH，1983)，随着红细胞保存时间的延长。由于骆驼科动物血液钠离子含量远高于人类血浆中钠离子含量，故直接使用人类红细胞保存液对骆驼科动物红细胞进行保存时，由于渗透压差造成红细胞破碎溶血，故而需要配制专用与骆驼科的红细胞保存液对骆驼科红细胞进行保存，至今未见有关骆驼科动物红细胞保存液的公开文献报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足而提供的一种动物红细胞保存液的配制方法及其应用，采用ATP与谷胱甘肽、柠檬酸钠、葡萄糖、柠檬酸、磷酸二氢钠和甘露醇配置的溶液，用于骆驼科动物红细胞的输注和体外保存，有效保存期达30天，对保存期间骆驼红细胞形态学、红细胞ATP含量及保存液上清游离血红蛋白进行测定，保持了骆驼科动物特有的红细胞形态，体外保存效果良好，红细胞成活率>70％，保存液配置方法简单，试剂材料易得，是一种高效、经济且符合能源资源节约的绿色制备方法。