[发明专利]具有Fc突变体的抗体与效应细胞的组合、用途和制法

说明书

本发明提供了具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体和高效免疫效应细胞的组合，其中，所述Fc突变体具有A330L/I332E突变；所述效应细胞为表达CD16的效应细胞。本发明还提供了所述组合在制备抗肿瘤的药物中的用途。本发明还提供了所述组合的制备方法。本发明的组合采用NKT细胞为效应细胞，联合具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体，实现了更高的肿瘤靶细胞杀伤活性，进一步提升了抗肿瘤的能力。

技术领域

本发明涉及肿瘤的免疫治疗领域。具体地，本发明涉及具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体和高效免疫的效应细胞的组合、使用具有Fc突变体的靶向肿瘤抗原的抗体与效应细胞的组合进行肿瘤的免疫治疗的试剂盒以及它们的制备方法。

背景技术

抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白，分子量150kD左右。抗体可以被木瓜蛋白酶消化成Fab段和Fc段。Fab段有两个抗原结合位点，发挥特异性结合抗原的作用，而Fc段在抗体的效应功能中发挥至关重要的作用。多数抗体的效应功能是通过Fc段与Fc受体相互作用介导的。人的Fc受体有FcγRⅠ(CD64)，FcγRⅡ(CD32)和FcγRⅢ(CD16)三种。FcγRⅢ(CD16) 又包括FcγRⅢA和FcγRⅢB。FcγRⅡB只发现于中性粒细胞中，而FcγRⅢA 在巨噬细胞、单核细胞、自然杀伤细胞(NK)和T细胞亚群中表达。FcγRIIIA 是表达在NK细胞上的唯一Fc受体，可发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)。即抗体结合的靶细胞被FcγRⅢa识别后，激活NK细胞合成并分泌细胞因子，如IFN-γ和颗粒酶介导细胞毒性功能。

自然杀伤T细胞(NKT细胞)是一群异质性特化的T淋巴细胞，其区别于T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)，是一类新型的T 淋巴细胞，属于第4类免疫细胞。NKT细胞兼具NK细胞和T细胞的特性，可对免疫原的暴露快速应答，同时拥有适应性免疫细胞对免疫原的准确识别功能，诱导多种应答反应。NKT细胞分为两类，包括不变NKT(invariantNKT， iNKT，I型NKT)和变异NKT(variant NKT，II型NKT)；其中，iNKT 表达恒定的T细胞抗原受体(T cell receptor，TCR)，在小鼠中是Vα14-Jα281α链，人体内是Vα24-JαQ链。在机体内主要发挥抗肿瘤以及抗感染的作用；而变异NKT则拥有多样的TCR库，主要通过分泌多种细胞因子发挥免疫调控的作用。

近几年在其表型特征、分布及发育、免疫学效应及与疾病关系、肿瘤治疗等方面的研究有了很大进展。不同于传统的T细胞，NKT细胞表达的TCR 由保守的非多态性的MHC H类样分子CD1d识别。而iNKT细胞最佳刺激效应物是一类来源于海绵体或者共生微生物的提取物，α半乳糖神经酰胺 (glycolipidα-galactosylceramide，α-GalCer)。NKT细胞在自身配体及合成配体的刺激下，通过活化膜表面IL-12受体，刺激树突状细胞(Dendritic Cells，DC)分泌大量的IL-12，促使未DC细胞的分化及成熟；同时NKT细胞分泌大量的IFN-γ，IFN-γ可作用于NK细胞分泌大量的穿孔素，杀伤靶细胞；树突状细胞分泌的IL-12作用于初始CD4+T细胞，促进适应性免疫向Th1 型转化，增强细胞免疫应答。在上述因素共同作用下，可介导病毒感染或者胞内寄生菌感染的靶细胞和肿瘤靶细胞发生溶解破坏。NKT还可通过表达人凋亡相关因子配体(Factor-related Apoptosis ligand,FasL)，经人凋亡相关因子/人凋亡相关因子配体(Fas/FasL)途径直接杀伤上述靶细胞。活化NKT 细胞可分泌IL-4和IFN-γ等细胞因子发挥免疫调节作用。此外NKT细胞还可分泌多种趋化性细胞因子等参与炎症反应。

NKT细胞作为一类新型的免疫调节细胞，在抗肿瘤、抗感染、抑制自身免疫性疾病及移植耐受中具有远大的应用前景。CD3+/CD16+CD56+T细胞并不是一群典型的NKT细胞，但是却是T细胞亚群中更为广泛的一群，也符合NKT的最初的定义。