[发明专利]一种用于纯化他克莫司的层析柱及他克莫司的纯化方法

权利要求书

1.一种他克莫司的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一待分离液的制备：将他克莫司粗品溶解于乙酸乙酯后，加入非极性烷烃或石油醚，制成第一待分离液；

上样：将第一待分离液上样层析柱，形成含有他克莫司的第一层析柱；

洗脱：用第一洗脱溶剂对第一层析柱进行梯度洗脱，所述第一洗脱溶剂由非极性烷烃或石油醚与乙酸乙酯混合配制，收集他克莫司含量98％以上的洗脱液；

所述第一待分离液的制备步骤中，所述他克莫司粗品和乙酸乙酯的质量比为1:4-8；加入非极性烷烃或石油醚的体积为乙酸乙酯体积的15-25％；

上样步骤中，所述第一待分离液的添加量为10-40g/L层析柱体积；

洗脱步骤中，所述第一洗脱溶剂中，非极性烷烃或石油醚与乙酸乙酯的质量比为1-5:1；洗脱流速为每小时1-6个柱体积，跟踪监测纯度；

所述层析柱分为上部和下部，所述层析柱的下部填充第一层析介质填料，所述层析柱的上部填充第一混合填料，所述层析柱下部第一层析介质填料高度占层析柱总填料高的5-10％，所述层析柱的直径与高度比为1:5-25；

所述第一层析介质填料为粒度为200-500目的层析硅胶或氧化铝；所述第一混合填料为1-50重量份石墨烯粉末与100重量份的第一层析介质填料混合制备；所述石墨烯粉末的粒度为500-5000目；

所述他克莫司粗品为他克莫司发酵菌丝醇提取物萃取浓缩后粗结晶样品；样品组分包括他克莫司、二氢他克莫司、子囊霉素和8-epi tacrolimus。

2.一种他克莫司的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

第二待分离液的制备：将他克莫司粗品溶解于乙醇、丙酮、甲醇或乙腈溶液，再加入水进行搅拌稀释，制成第二待分离液；

上样：将第二待分离液上样层析柱，形成含有他克莫司的第二层析柱；

洗脱：用第二洗脱溶剂对第二层析柱进行梯度洗脱，第二洗脱溶剂由水与乙醇、丙酮、甲醇或乙腈溶液混合配制，收集他克莫司含量98％以上的洗脱液；

第二待分离液的制备步骤中，所述他克莫司粗品与乙醇、丙酮、甲醇或乙腈溶液的质量比为1:4-8；加入水的体积为乙醇、丙酮、甲醇或乙腈溶液体积的15-25％；

上样步骤中，所述第二待分离液的添加量为10-40g/L层析柱体积；

洗脱步骤中，所述第二洗脱溶剂中，水与乙醇、丙酮、甲醇或乙腈溶液的质量比为10-11:9-20；洗脱流速为每小时1-6个柱体积，跟踪监测纯度；

所述层析柱分为上部和下部，所述层析柱的下部填充第二层析介质填料，所述层析柱的上部填充第二混合填料；所述层析柱下部第二层析介质填料高度占层析柱填料总高的5-10％，所述层析柱的直径与高度比为1:10-25；

所述第二层析介质填料为粒度为200-500目的十八烷基键合硅胶、辛烷键合硅胶、氰基键合硅胶或苯基键合硅胶，所述第二混合填料包括1-50重量份石墨烯粉末和100重量份的第二层析介质填料，所述石墨烯粉末的粒度为500-5000目；

所述他克莫司粗品为他克莫司发酵菌丝醇提取物萃取浓缩后粗结晶样品；样品组分包括他克莫司、二氢他克莫司、子囊霉素和8-epi tacrolimus。