[发明专利]一种粘质沙雷氏菌代谢产物及作为水产免疫增强剂的应用

说明书

本发明公开了一种粘质沙雷氏菌代谢产物及作为水产免疫增强剂的应用，利用粘质沙雷氏菌ATCC14756获得代谢产物，无需纯化分离，可直接作为水产免疫增强剂使用，对水产动物具有极好的免疫保护效果。本发明避免了繁琐的提取纯化过程，产物制备效率高，适于产业化推广。

技术领域

本发明涉及一种粘质沙雷氏菌代谢产物，具体涉及一种粘质沙雷氏菌代谢产物及作为水产免疫增强剂的应用，属于水产养殖技术领域。

背景技术

对于水产养殖来说，提高养殖动物的免疫力非常重要。目前提高养殖动物免疫力的常见措施如下：

1、注射疫苗，使养殖动物体内产生抗体，以增强其免疫力；

2、泼洒生物制剂改良水质，通常是利用益生菌消除水体中的氨氮和亚硝酸盐等有害成分，使养殖水体得到净化，从而使养殖动物在优良的水环境下保持良好的健康状态以增强其免疫力；

3、在饲料中添加微量元素，利用微量元素调节养殖动物体内免疫酶的活性，合使疫力得到增强；

4、在饲料中添加Vc等维生素含量，增强抗病能力；

5、在饲料中添加β-葡聚糖、虾青素等促进免疫器官发育的免疫调节剂，以提高免疫力；

6、增加营养供给，确保营养平衡，以提高免疫力；

7、通过种植水草、降低养殖密度和合理投喂等技术措施的应用，可改良养殖动物的生存环境，提高其抗应急能力和降低其发病率。

这些技术措施主要是通过改良养殖环境和调节动物营养状况来实现提高免疫力，免疫力提高程度有限，而且一旦在养殖体系内出现病症，会很难抵御疾病的扩散。

目前有报道粘质沙雷氏菌的红色代谢产物灵菌红素，其是一类具有多吡咯环的天然红色素的总称，分子结构通常都有3个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构，具有抗肿瘤、免疫抑制、抗菌性、抗疟疾性等多种生物学活性。但是，一方面灵菌红素的提取纯化过程繁琐且效率低下，不适于产业化推广；另一方面灵菌红素对水产生物的免疫增强作用有限，故申请人对粘质沙雷氏菌代谢产物应用于水产免疫增强剂进行了更深层次的研究。

发明内容

本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种粘质沙雷氏菌代谢产物及作为水产免疫增强剂的应用。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种粘质沙雷氏菌代谢产物，是通过以下方法制备得到的：粘质沙雷氏菌ATCC14756活化后接种于种子培养基中，27～33℃培养12～18小时，得菌株种子液；取菌株种子液接种于发酵培养基中，27～33℃、180～200rpm/min振荡培养，离心，收集发酵上清液，沉淀，即得一种粘质沙雷氏菌代谢产物；

其中，种子培养基的配方为：胰蛋白胨8～12g，酪蛋白胨8～10g，可溶性淀粉6～9g，6波美麦芽汁400～500mL，海水晶3～5g，醋酸铵2～4g，FeSO₄ 0.2～0.3g，CaCl₂ 3～4g，蒸馏水900～1100mL，pH＝6.8～7.2，121℃灭菌20～30分钟；发酵培养基的配方为：酵母浸膏4～6g，¹³C标记蔗糖0.2～0.3g，MgSO₄·7H₂O 5～8g，NaNO₃ 5～8g，KCl 8～12g，蒸馏水900～1100mL，pH＝6.8～7.2，121℃灭菌20～30分钟；¹³C标记蔗糖耗尽时结束培养。

优选的，利用LB培养基进行活化处理，具体方法是：将粘质沙雷氏菌ATCC14756从保藏菌种的试管斜面中取出转移至LB培养基上，28℃恒温箱中倒置培养24～72小时即可。