[发明专利]一种粘质沙雷氏菌代谢产物及作为水产免疫增强剂的应用在审
| 申请号： | 201910032527.5 | 申请日： | 2019-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN109679873A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 杨移斌;艾晓辉;董靖;杨秋红;胥宁;刘永涛 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P1/04;A01K61/13;C12R1/43 |
| 代理公司： | 杭州永航联科专利代理有限公司 33304 | 代理人： | 侯兰玉 |
| 地址： | 430233 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 粘质沙雷氏菌 免疫增强剂 代谢产物 水产 免疫保护效果 产物制备 纯化分离 水产动物 提取纯化 产业化 应用 | ||
1.一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，是通过以下方法制备得到的：粘质沙雷氏菌ATCC14756活化后接种于种子培养基中，27～33℃培养12～18小时，得菌株种子液；取菌株种子液接种于发酵培养基中，27～33℃、180～200rpm/min振荡培养，离心，收集发酵上清液，沉淀，即得一种粘质沙雷氏菌代谢产物；
其中，种子培养基的配方为：胰蛋白胨8～12g，酪蛋白胨8～10g，可溶性淀粉6～9g，6波美麦芽汁400～500mL，海水晶3～5g，醋酸铵2～4g，FeSO4 0.2～0.3g，CaCl2 3～4g，蒸馏水900～1100mL，pH=6.8～7.2，121℃灭菌20～30分钟；发酵培养基的配方为：酵母浸膏4～6g，13C标记蔗糖0.2～0.3g，MgSO4·7H2O 5～8g，NaNO3 5～8g，KCl 8～12g，蒸馏水900～1100mL，pH=6.8～7.2，121℃灭菌20～30分钟；13C标记蔗糖耗尽时结束培养。
2.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，利用LB培养基进行活化处理，具体方法是：将粘质沙雷氏菌ATCC14756从保藏菌种的试管斜面中取出转移至LB培养基上，28℃恒温箱中倒置培养24～72小时即可。
3.根据权利要求2所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，粘质沙雷氏菌ATCC14756转移至LB培养基的接种量为体积百分数2～3%。
4.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，发酵培养为通气培养，其空气通量为10～12L/min。
5.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，菌株种子液在发酵培养基中的接种量为体积百分数6～8%。
6.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，制备发酵培养基时先加入1/2配方量的13C标记蔗糖，振荡培养过程中监测13C标记蔗糖的用量，13C标记蔗糖耗尽时分批补加剩余量的13C标记蔗糖，直至所有的13C标记蔗糖全部耗尽，培养结束。
7.根据权利要求6所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，13C标记蔗糖的补加次数为3～5次，每次补加量相同。
8.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，离心条件为：8000～12000rpm/min离心15～20分钟。
9.根据权利要求1所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物，其特征在于，沉淀方法为：利用质量浓度50～80%硫酸铵进行沉淀并收集。
10.权利要求1～9中任一项所述的一种粘质沙雷氏菌代谢产物作为水产免疫增强剂的应用。
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