[发明专利]一种从荸荠皮中提取黄酮类色素的方法

权利要求书

1.一种从荸荠皮中提取黄酮类色素的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将荸荠皮粉碎、清洗、研磨；

(2)研磨后进行酶解、离心得沉淀物；

其中，所述的酶解方法为用蛋白酶K和DTT进行消化。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述消化为利用1～5mg/ml的蛋白酶K溶液和100～200mg/ml的DTT溶液进行消化，所述消化的时间为7～12min。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述消化的方法为:将研磨后的荸荠皮组织溶于PBS溶液中，加入DTT溶液，摇匀后加入蛋白酶K溶液和DTT溶液进行消化反应。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述酶解的方法为用蛋白酶K和DTT消化两次。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酶解的方法为：将研磨后的组织溶按质量体积比1:10～30g/μl加入于PBS溶液中，然后加入DTT溶液，加入量按组织与DTT溶液的质量体积比为2.5～5:1g/μl计算；摇匀后加入蛋白酶K溶液以及DTT溶液，蛋白酶K溶液的加入量按组织与与蛋白酶K溶液的质量体积比为12.5～25:1g/μl计算，DTT溶液的加入量按组织与DTT溶液的质量体积比为2～5:1g/μl计算，然后进行消化反应，反应后离心、清洗、离心、沉淀重悬后加入蛋白酶K溶液和DTT溶液进行第二次消化反应。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括:在酶解、离心后，将沉淀再次进行清洗和离心，方法为：将沉淀物悬浮于含有1～5％TritonX-100的PBS溶液中，摇匀，离心，清洗。

7.根据权利要求1～6任一项所述的方法，其特征在于，所述离心的方法为：转速为10000～15000rpm，时间为10～20min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将荸荠皮组织粉碎、清洗的具体方法为：将荸荠皮切成小块，除去污渍后离心，沉淀清洗后离心，得沉淀后再次清洗、离心，将沉淀悬浮于含有1～5％TritonX-100的PBS溶液中，再次离心、清洗得到沉淀，所述离心的方法为：转速为10000～15000rpm，时间为7～12min；所述清洗的方法为：用双蒸水和/或PBS溶液清洗，清洗1～6遍。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述研磨的方法为在液氮中研磨至粉末状，过30～50目筛。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述干燥的方法为：冷冻型干燥器干燥2～6h，干燥温度为-20℃至-70℃。