[发明专利]一种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳米粒子二聚体的制备方法及其应用

说明书

本发明属于生物成像技术领域，尤其涉及一种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳米粒子二聚体的制备方法及其应用。本发明提供了一种功能化金纳米粒子的制备方法，本发明将制备的功能化金纳米粒子作为探针，形成金纳米粒子二聚体，并将其用于测定大鼠血清铜离子，为测定铜离子提供了一种新的方法，为金属阳离子提供了急性中毒处理指导，本发明实现了将点击反应化学用于暗场成像。

技术领域

本发明涉及生物成像技术领域，尤其涉及一种功能化金纳米粒子及其制备方法、金纳米粒子二聚体的制备方法及其应用。

背景技术

局部表面等离子体共振(LSPR)光散射相关方法在化学、生物医药等方面的应用是很有前景的，因为LSPR赋予光散射以一种易于区别于其他粒子散射的特征波段。基于LSPR的暗场显微镜(DFM)是一种有前途的非破坏性和非光漂白生物成像技术。近年来，研究者们通过DFM记录贵金属纳米粒子LSPR的波长变化，对检测生物分子或跟踪动态生物物理过程进行了大量的工作。贵金属纳米颗粒表面的LSPR在生物医学和光电等领域得到了广泛的研究。金纳米粒子(AuNPs)作为光学换能器因其独特且优异的光学和电学性质而被广泛用于生物分析、化学和生物传感。

点击反应化学与代谢标记已被广泛用于选择性成像DNA、蛋白质和标记小分子。然而，尚未有将点击反应化学用于暗场成像的报道，现有的金纳米粒子未能实现通过点击反应化学进行生物成像研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种功能化金纳米粒子及其制备方法，该功能化金纳米粒子能够实现将点击反应化学用于暗场成像。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种功能化金纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

将聚乙二醇-金纳米粒子、2-氨基乙硫醇和酯类化合物混合，进行酰胺反应，得到功能化金纳米粒子；

所述酯类化合物中含有炔基或叠氮基；

所述功能化金纳米粒子包括炔基功能化金纳米粒子或叠氮基功能化金纳米粒子。

优选的，所述酯类化合物为化合物1或叠氮-PEG4-NHS酯；所述化合物1的结构式为：

优选的，所述聚乙二醇-金纳米粒子、2-氨基乙硫醇和酯类化合物的质量比为1:10:10。

优选的，所述酰胺反应的温度为20～30℃，时间为1～4h。

本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。

本发明提供了一种金纳米粒子二聚体的制备方法，包括以下步骤：

将炔基功能化金纳米粒子、叠氮基功能化金纳米粒子、铜盐、抗坏血酸钠和三-(3-羟基丙基三唑基甲基)胺混合，进行环加成反应，得到金纳米粒子二聚体；所述炔基功能化金纳米粒子和叠氮基功能化金纳米粒子为上述技术方案所述功能化金纳米粒子或由上述技术方案所述制备方法制备得到的功能化金纳米粒子。

优选的，所述炔基功能化金纳米粒子和叠氮基功能化金纳米粒子的摩尔比为1:1。

优选的，所述炔基功能化金纳米粒子、抗坏血酸钠和三-(3-羟基丙基三唑基甲基)胺的摩尔比为0.2:5:5。

优选的，所述环加成反应的温度为20～30℃，时间为1～9h。

本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备的金纳米粒子二聚体在铜离子暗场成像中的应用。