[发明专利]一种鳗鲡爱德华菌噬菌体的制备方法、微生态制剂和应用在审
| 申请号: | 201910014847.8 | 申请日: | 2019-01-08 |
| 公开(公告)号: | CN109652383A | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
| 发明(设计)人: | 林茂;付汉清;翟少伟;陈躬浩 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;A61K35/76;A61P31/04;C12R1/92 |
| 代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
| 地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鳗鲡 爱德华氏菌 噬菌体培养 噬菌体 制备 微生态制剂 发酵菌液 噬菌体效价 液体培养基 发酵培养 培养周期 菌液 接种 应用 养殖 | ||
1.一种鳗鲡爱德华氏菌噬菌体的制备方法,包括以下步骤:
1)将鳗鲡爱德华氏菌接种于液体培养基中进行发酵培养获得发酵菌液;
2)向步骤1)中所述发酵菌液中接入所述鳗鲡爱德华氏菌的噬菌体获得噬菌体培养体系,进行噬菌体培养;
3)当所述噬菌体培养至10~20h时,开始向噬菌体培养体系中连续流加爱德华氏菌菌液;使所述噬菌体培养体系中爱德华氏菌的菌浓度为108~1014CFU/ml;
4)当所述噬菌体培养至18~24h时结束培养,获得鳗鲡爱德华氏菌噬菌体发酵液。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述连续流加爱德华氏菌菌液的总时间为4~10h;所述连续流加爱德华氏菌菌液的总体积为所述噬菌体培养体系体积的5~20%。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述接入的噬菌体的体积为发酵菌液体积的1~10%。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述接入的噬菌体的效价为108~1012PFU/ml。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述噬菌体培养的温度为24~32℃,所述噬菌体培养的过程中伴随搅拌,所述搅拌的转速为100~220rpm。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述的发酵菌液中爱德华氏菌的菌浓度为108~1014CFU/ml。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述的液体培养基包括以下组分:
脑心浸粉1~20g/L;蛋白胨1~20g/L;D-葡萄糖1~10g/L;磷酸二氢钠1~5g/L;氯化钠1~10g/L;所述液体培养基的pH值为7.0~8.0。
8.一种鳗鲡爱德华氏菌噬菌体微生态制剂,其特征在于,所述微生态制剂的制备方法,包括以下步骤:将权利要求1~5任意一项所述制备方法制备获得的鳗鲡爱德华氏菌噬菌体在45~65℃条件下加热2~5h,获得鳗鲡爱德华氏菌噬菌体微生态制剂。
9.根据权利要求8所述的鳗鲡爱德华氏菌噬菌体微生态制剂,其特征在于,所述鳗鲡爱德华氏菌噬菌体微生态制剂中噬菌体的效价为1010~1016PFU/ml。
10.权利要求8或9的鳗鲡爱德华氏菌噬菌体微生态制剂在制备防治鳗鲡爱德华氏菌病药物中的应用。
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