[发明专利]一种小米1H-NMR指纹图谱的构建方法和应用

说明书

本专利公开了一种小米¹H‑NMR指纹图谱的构建方法和应用，属于指纹图谱的构建技术领域。本发明采用核磁共振技术获得小米的指纹图谱特征峰，该指纹图谱能全面反映小米的化学成分和品质特性，可用于不同产地小米的质量评价，同时也为小米原产地域和地理标志的保护提供技术支撑。

技术领域

本发明涉及指纹图谱的构建，具体是一种基于¹H-NMR核磁共振技术的小米指纹图谱的构建方法，以及在小米质量评价方面的应用。

背景技术

小米是谷子脱壳的产物，起源于中国已有8700多年历史。谷子是我国粮饲兼用并具有药用价值的作物，也是北方地区人民群众不可缺少的重要粮食作物之一。占我国粮食作物播种面积的5％左右，占北方粮食作物播种面积的10％～15％。小米性味甘、咸凉，能益脾和胃，有益丹田、开肠胃。据《本草纲目》载：粟之味咸淡，气寒下渗，肾之谷也，肾病宜食之，虚热消渴泻痢……所以泻肾邪也，降胃火，故脾胃之病宜食之。煮粥食，宜丹田，补虚损，开肠胃。

小米的品质、口感与其所含的化学成分密切相关，不仅包括碳水化合物、淀粉、蛋白质等大分子营养成分，而且还包括氨基酸、有机酸、单糖等小分子物质。指纹图谱可以获得样品中小分子物质的整体化学信息，可作为小米质量评价的有效手段。然而，目前尚无可全面表征小米质量指纹图谱的相关研究报道。核磁共振技术可以检测样品中大多数的小分子有机化合物，因此，本发明的目的在于采用核磁共振指纹技术建立一种方便、有效并能全面整体地对小米进行质量评价的方法。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术存在的问题，提供一种能较全面地表征小米化学组成的¹H-NMR指纹图谱及其构建方法，以及在小米质量评价中的应用。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种小米的¹H-NMR指纹图谱的构建方法，具体包括以下步骤：

(1)取干燥的小米粉末1g，加入5～20mL50％～80％乙醇超声提取10～60分钟；提取液于2000～5000rpm室温离心10～30分钟，上清液浓缩至溶剂尽，得到小米提取物；

(2)所得小米提取物，加入重水和氘代甲醇的混合溶液1000μL，10000～16000rpm离心10～30分钟，取上清液600μl转移到核磁管用核磁共振仪测试，采用核磁数据处理软件对图谱进行数据处理，获得小米的¹H-NMR指纹图谱；

(3)对小米的¹H-NMR指纹图谱进行指认鉴别，利用标准品对照结合核磁共振峰的化学位移及耦合常数分析，确定小米指纹图谱的特征峰包括：缬氨酸(δ＝1.061,d,J＝7.2Hz)、乙基葡萄糖(δ＝1.163,t,J＝7.2Hz)、乙醇(δ＝1.195,t,J＝7.2Hz)、乳酸(δ＝1.332,d,J＝7.2Hz)、丙氨酸(δ＝1.488,d,J＝7.2Hz)、醋酸(δ＝1.916,s)、谷氨酰胺(δ＝2.161,t,J＝7.8Hz)、琥珀酸(δ＝2.425,s)、天冬氨酸(δ＝2.655,dd,J＝16.8Hz,7.8Hz)、柠檬酸(δ＝2.537,d,J＝16.2Hz)、天冬酰胺(δ＝2.955,dd,J＝16.8Hz,4.2Hz)、胆碱(δ＝3.218,s)、TMAO(δ＝3.242,s)、甜菜碱(δ＝3.281,s)、蔗糖(δ＝5.407,t,J＝3.6Hz)、β-半乳糖(δ＝4.594,d,J＝7.8Hz)、棉子糖(δ＝4.965,d,J＝3.6Hz)、ɑ-木糖(δ＝5.174,d,J＝3.6Hz)、ɑ-葡萄糖(δ＝5.196,d,J＝3.6Hz)、ɑ-半乳糖(δ＝5.263,d,J＝4.2Hz)、尿嘧啶核苷(δ＝5.901,d,J＝4.8Hz)、富马酸(δ＝6.529,s)、酪氨酸(δ＝7.184,d,J＝7.8Hz)、次黄嘌呤(δ＝8.201,s)、腺苷(δ＝8.358,s)、甲酸(δ＝8.468,s)、葫芦巴碱(δ＝9.154,s)。