[发明专利]多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白纳米探针及制备方法

说明书

本发明公开了一种多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白纳米探针及制备方法，利用白蛋白为原料，通过调整包载的荧光染料以及两种治疗药物的比例及溶剂，制备出可以多种药物共载和示踪的白蛋白纳米探针。本发明制备的纳米颗粒可以实现多种药物共载；具有较低的细胞毒性。可以通过观察纳米颗粒内cy5染料的分布情况来实时跟踪药物所到达的位置。

技术领域

本发明涉及纳米医药技术领域，更具体的是涉及一种多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋 白纳米探针及制备方法。

背景技术

阿尔茨海默症是一种中枢神经系统退行性疾病。随着我国进入人口老龄化阶段，阿 尔茨海默症患病人数大幅增加，对于人类健康乃至社会和谐造成了极大的危害。由于阿兹海默症的复杂的发病机理，采用单一药物治疗效果差。因此，如何有效实现多种药物 (如多奈哌齐及氯碘羟喹)的协同作用是提高阿尔茨海默症治疗效果的关键科学问题。

纳米技术的快速发展使得设计多种药物共载的递送系统，将药物分子仅分配到靶位 点，而不影响健康的器官和组织成为可能。白蛋白具有安全无毒、无免疫原性、可生物降解、生物相容性好等优点，因而作为药物颗粒得到广泛的研究。白蛋白中的氨基酸以 肽键相连接，且扭曲成团状，具网状空隙，为镶嵌携带药物创造了有利条件；白蛋白本 身也含有氨基和羧基基团可作为靶向肽的修饰位点；当与药物结合后，可延缓药物在注 射部位的释放，并能提高药物疗效和降低毒副作用；制备过程中形成疏水空腔，克服了 疏水性药物的缺陷；与脂质体和乳剂相比，白蛋白纳米粒的体内和贮存稳定性较好。亲 水性好，

此外，用常规药物进行治疗时无法进行示踪，也就无法判定药物是否到达病灶。于是可以通过先合成一种可以装载有机染料(如花氰染料cy5)来对颗粒进行着色，以达 到示踪的目的，并评估药物是否进入了靶向细胞。因此，研制出一种具有多种治疗药物 共载，细胞毒性小，并且可以实时示踪等优势的新型白蛋白颗粒具有重大的意义，在生 物技术和医药技术领域具有重要的科研和临床应用前景。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白 纳米探针的制备方法，解决现有技术中单一药物治疗阿兹海默症效果差、常规药物进行治 疗时无法进行示踪的问题。

本发明的技术方案是：

一种多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白纳米探针，由如下方法制备：

1)量取白蛋白水溶液；

2)加入用二氯甲烷、乙醇或者二甲基亚砜配置的氯碘羟喹溶液，多奈哌齐溶液以及cy5 溶液；

3)搅拌后，加入70～100μl的戊二醛交联剂水溶液，相同搅拌条件下继续反应2～6小 时；

4)待反应结束,用水系滤膜过滤；

5)滤液离心，去离子水洗涤，得到多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白纳米探针。

所述步骤(1)白蛋白水溶液浓度为10～20mg/ml，量取量为2～2.5ml。

所述步骤(2)氯碘羟喹溶液浓度为40～60mg/ml，量取量为5～15μl，多奈哌齐溶液浓 度为40～60mg/ml量取量为1～5μl，cy5溶液浓度为80～100mg/ml，量取量为1～3μl。

所述步骤(3)搅拌条件为100～800rpm/min，15～50℃条件下磁力搅拌2～3min。

所述步骤(4)水系滤膜为220nm水系滤膜。

所述步骤(5)滤液以6,000～8,000rpm/min，离心3～10min离心，去离子水洗涤1～3遍。

一种多种阿兹海默治疗药物共载的白蛋白纳米探针的制备方法，包括以下步骤：

1)量取白蛋白水溶液；