[发明专利]制备分离基质的方法

权利要求书

1.一种制备分离基质的方法，包括以下步骤：

a) 提供固体载体和衍生自细菌免疫球蛋白-结合蛋白的碱稳定性配体；

b) 使所述碱稳定性配体与所述固体载体反应以形成具有共价偶联的碱稳定性配体的分离基质；和

c) 用包含至少10 mM的碱金属氢氧化物，例如NaOH或KOH或其任何混合物的洗涤溶液洗涤所述具有共价偶联的碱稳定性配体的分离基质。

2.权利要求1的方法，其中所述衍生自细菌免疫球蛋白-结合蛋白的碱稳定性配体是碱稳定性蛋白A配体。

3.权利要求1的方法，其中所述衍生自细菌免疫球蛋白-结合蛋白的碱稳定性配体是碱稳定性蛋白L配体。

4.权利要求1的方法，其中所述衍生自细菌免疫球蛋白-结合蛋白的碱稳定性配体是碱稳定性蛋白G配体。

5.任何前述权利要求的方法，其中所述固体载体包含多个载体颗粒，例如多个多孔的载体颗粒。

6.任何前述权利要求的方法，其中步骤c)重复至少1次。

7.任何前述权利要求的方法，其中步骤c)重复至少5次。

8.任何前述权利要求的方法，进一步包括在步骤c)之后，转移所述分离基质至储存溶液的步骤d)。

9.权利要求8的方法，进一步包括在步骤d)之后，分配所述分离基质到运输容器中的步骤。

10. 任何前述权利要求的方法，其中步骤c)在步骤b)之后的24 h内进行。

11. 任何前述权利要求的方法，其中在步骤c)中，所述洗涤溶液包含25 mM – 1 M的碱金属氢氧化物，例如NaOH或KOH或其任何混合物。

12. 任何前述权利要求的方法，其中在步骤c)中，所述洗涤溶液包含40 mM – 1 M的碱金属氢氧化物，例如90 mM – 0.5 M的碱金属氢氧化物，或50 – 200 mM的碱金属氢氧化物。

13. 任何前述权利要求的方法，其中在步骤c)中，所述洗涤溶液包含40 mM – 1 MNaOH或KOH，例如90 mM – 0.5 M NaOH或KOH，或50 – 200 mM NaOH或KOH。

14. 任何前述权利要求的方法，其中在步骤c)中，在2-60 min，例如5-30 min期间用洗涤溶液孵育所述分离基质。

15.权利要求14的方法，其中在孵育之后，通过过滤除去所述洗涤溶液。

16.任何前述权利要求的方法，其中在步骤c)中，温度是2-40℃，例如15-30℃或20-25℃。

17.任何前述权利要求的方法，进一步包括在步骤b)之前，活化所述固体载体的步骤a’)。

18.权利要求17的方法，其中步骤a’)包括在所述固体载体上形成醛基团。

19.权利要求17的方法，其中步骤a’)包括在所述固体载体上形成环氧化物基团。

20.权利要求19的方法，其中在步骤b)之后，所述分离基质包含残留的环氧化物基团。

21. 权利要求15 – 17中任一项的方法，其中所述衍生自细菌免疫球蛋白-结合蛋白的碱稳定性配体包含能够与所述醛或环氧化物基团反应的赖氨酸残基。