[发明专利]抗A组链球菌的免疫原性肽

说明书

一种经修饰的p145肽，具有增强的粘膜免疫原性，用于在诸如人的哺乳动物中引起对A组链球菌的粘膜免疫反应。肌内施用改良的p145 5肽可能特别有效。S2肽或变体可与经修饰的p145肽共同施用以增强免疫反应。

技术领域

本发明涉及用于预防和治疗A组链球菌相关疾病和病症的免疫原性肽。

背景技术

正在将合成和重组肽开发成疫苗，以预防和保护对抗多种传染病和非传染病。它们的效用在于其能够模拟外源或宿主蛋白质上的天然表位，并特异性激活或调节保护性或伤害性免疫反应。许多非传染性疾病，包括癌症、过敏症、多发性硬化症和慢性疾病，如高血压、糖尿病和老年痴呆症，都取得了重大进展(1)。然而，它们最大的希望在于预防传染病的疫苗。在这里，它们的小体积极大地促进了设计包含来自多个靶抗原(2)的表位的多组分疫苗，可以防止以多种等位基因形式存在的生物体的感染(3)的疫苗，以及能够靶向隐藏或隐匿的表位而产生免疫反应的疫苗，所述免疫反应不是由所述生物体自然诱导的，而是一旦由所述疫苗诱导则对该生物体致死(4)。

B细胞和T细胞识别的表位较小，由于它们的大小，可容易且廉价地合成。然而，由于它们较小，它们刺激的B细胞或T细胞文库非常有限，并且主要是因为这个原因，还没有开发出肽基疫苗并获得用于人类的许可。

长期以来一直在寻找抗化脓链球菌(Lancefield A组链球菌；GAS)的疫苗，这是由于该细菌引起的衰弱性疾病，特别是风湿热和风湿性心脏病。风湿热是当今大多数发达国家不常见的疾病，但它仍然是发展中国家儿童、青少年和年轻人获得性心脏病的主要原因。此外，侵袭性GAS病是儿童和成人败血症的常见病因，且病死率高。链球菌感染后肾小球肾炎进一步加重了GAS疾病的负担，这可能导致许多GAS流行地区中终末期肾功能衰竭的高发率。GAS咽炎和脓疱病造成每年GAS感染的最大绝对数量。GAS咽炎每年影响约8％-15％的学龄儿童，GAS脓疱病是一种非常常见的感染，儿童患病率为10-50％。严重的GAS相关疾病不仅在发展中国家是一个问题，甚至在发达国家也出现了毒力特别强的GAS菌株，它们对标准的抗生素疗法具有耐药性，并导致诸如严重坏死性筋膜炎等衰弱性疾病。

抗A组链球菌的肽基疫苗主要针对M蛋白衍生肽，如p145、J8和J14肽。目前，嵌合酵母衍生螺旋肽(GCN4)氨基酸序列的含p145内12氨基酸最小表位的J8肽是一种领先的候选疫苗(12)。GCN4氨基酸序列有助于维持肽螺旋性，从而优化最小表位对免疫系统的展示。这种候选疫苗也需要三剂来诱导针对皮肤病的保护(19)。

发明详述

令人惊讶的是，本发明人发现，p145肽的免疫原性可通过靶向修饰p145的氨基酸序列而明显提高。用单剂量的经修饰的p145肽进行免疫，而不是多次免疫，可以对抗甚至是高致病性菌株如CovR/S突变株的A组链球菌感染。出乎意料的是，经修饰的p145肽、片段或变体在施用于哺乳动物时引起粘膜免疫反应。所述粘膜免疫反应的特点是产生IgG，而IgA的产生基本上不存在或者与产生的IgG水平相比处于相对降低的水平。

本发明广义上涉及一种p145肽，其包含可明显改善或增强免疫原性的一种或多种氨基酸序列修饰，具体是对于引起粘膜免疫反应而言。在优选形式中，所述肽包含SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列。

本发明的一个方面提供了一种在哺乳动物中引起对A组链球菌的免疫反应的方法，所述方法包括将以下施用于所述哺乳动物从而引起所述免疫反应的步骤：分离的蛋白质，其包含经修饰的p145肽氨基酸序列，所述氨基酸序列含有SEQ ID NO:3的残基13和17的氨基酸取代；抗体或抗体片段，其结合所述分离的蛋白质或其片段或变体或针对所述分离的蛋白质或其片段或变体而产生；或编码所述分离的蛋白质或其片段或变体的分离的核酸。