[发明专利]抗体变体

说明书

本发明涉及与TNFα结合并表现出修饰的FcRn结合的抗体。本发明的抗体具有良好的效应子功能和/或药代动力学性质。

技术领域

本发明涉及具有改变的效应子功能和/或改变的药物动力学性质的修饰的抗体。该抗体可用于治疗各种疾病，特别是炎性疾病。

背景技术

在过去的20年中，单克隆抗体作为临床医学治疗剂的重要性日益提高。多年来，改善抗体的努力集中于降低其潜在的免疫原性，从而导致人源化或完全人源化的抗体。另一种方法旨在通过改善其效应子功能(effector functions)来优化抗体。虽然直接作用是由抗体的可变抗原结合区介导的，但是间接作用是由恒定Fc区介导的。改善效应子功能的努力主要集中在调节Fc区。另外，需要改善治疗性抗体的血清半衰期，这可以减少所需抗体的量，并可以通过延长治疗间隔来增加其对患者的便利性。

对于治疗应用，由于多种原因，免疫球蛋白G(IgG)已成为优选的选择；IgG易于纯化，储存相对稳定，可以静脉内给药，在体内具有延长的生物半衰期，并且能够发挥一系列生物效应功能，例如激活补体依赖性细胞毒性(CDC)和通过各种Fc受体相互作用(抗体依赖性细胞毒性；ADCC)的方式募集效应物细胞。在五种免疫球蛋白类别中，由于IgG与IgG循环受体，新生Fc受体(FcRn)的独特相互作用，因此其显示出最长的生物学半衰期。该受体的已知功能之一是从催化降解中拯救IgG。解析的FcRn-Fc共晶体结构表明与Fc的相互作用发生在IgG铰链-C_H2-C_H3区。在内体中，这种相互作用以严格的pH依赖性方式在酸性pH值为6.0-6.5时发生。结合的IgG分子被循环回到细胞表面，并在7.4的生理pH下释放到循环中，而非复合的IgG分子则被用于溶酶体降解。这种循环是延长IgG半衰期的机制。因此，FcRn-IgG相互作用的调节将允许特异性控制γ免疫球蛋白和Fc融合蛋白的血清半衰期。

取决于应用，可能需要增加或减少IgG的血清停留时间。对于治疗应用，期望更长的半衰期，因为将需要较小的剂量和较少的注射。已经研究了增加半衰期的几种方法，包括使用聚乙二醇(PEG)，生成白蛋白融合蛋白或Fc融合蛋白以及增强FcRn-IgG相互作用。聚乙二醇化的药物自1990年以来一直在临床中使用，聚乙二醇化是延长药物在血液中停留时间的成熟技术。由于人血清白蛋白(HSA)也可以通过FcRn以pH依赖的相互作用进行循环利用，因此还生产了一些白蛋白融合蛋白，以增强稳定性和半衰期。另外，在临床前研究中已证明与白蛋白或白蛋白结合域融合的抗体片段具有延长的血清停留时间。Fc融合蛋白的产生是另一种策略，可赋予蛋白或肽与完整抗体相似的特性。

已研究的Fc区的修饰被总结于Saxena(2016)Frontiers in Immunology第7卷的第580篇文章。

仍持续需要具有改善的效应子功能和/或药物动力学的抗体。

发明内容

本申请的发明人发现，抗体的Fc区域中的某些特定突变显著增加了在pH 6下抗体对FcRn的亲和力，而在pH 7.4下该亲和力仍然很低。具有该突变的抗体预期具有改善的药物动力学性质。另外，与诸如英夫利昔单抗(IFX)等已知抗体相比，该抗体表现出优异的效应子功能。

因此，本发明涉及以下项目[1]至[88]中定义的主题：

[1]一种抗体，包含TNFα结合结构域和FcRn结合位点，其在pH 6下对人FcRn具有高亲和力，所述高亲和力的特征在于解离平衡常数(K_D)小于100nM，并且进一步在pH 7.4下对人FcRn具有低亲和力，所述低亲和力的特征在于K_D大于1μM，其中所述抗体的氨基酸序列包含氨基酸434W。

[2]根据项目[1]的抗体，其中所述抗体的氨基酸序列进一步包含氨基酸428E和/或氨基酸311R。

[3]根据项目[1]或[2]的抗体，其中所述抗体的氨基酸序列包含氨基酸311R、428E和434W。