[发明专利]评估抗体-药物缀合物的方法

权利要求书

1.一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其包括：

将所述样品施加于尺寸排阻色谱基质；

检测所述样品在第一光波长λ1处的吸光度响应，其中所述第一光波长是所述抗体的预定吸光度最大值；

检测所述样品在第二光波长λ2处的吸光度响应，其中所述第二光波长是所述药物的预定吸光度最大值；

确定所述样品在所述第一光波长处的总吸光度和所述样品在所述第二光波长处的总吸光度，各个总吸光度通过经由对高分子量峰、低分子量峰和主峰的面积求和对在一定洗脱时间间隔内吸光度响应的峰进行积分来计算；以及，

使用以下公式1计算所述药物与抗体之比：

其中是所述抗体在所述第一光波长处的消光系数；是所述抗体在所述第二光波长处的消光系数；是所述药物在所述第一光波长处的消光系数；是所述药物在所述第二光波长处的消光系数；总面积_λ1是所述样品在所述第一光波长处的总吸光度；并且总面积_λ2是所述样品在所述第二光波长处的总吸光度。

2.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，进一步包括根据具有已知浓度的所述抗体的溶液分别在所述第一光波长或所述第二光波长处的吸光度，计算所述抗体在所述第一光波长处或在所述第二光波长处的消光系数。

3.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，进一步包括根据具有已知浓度的所述药物的溶液分别在所述第一光波长或所述第二光波长处的吸光度，计算所述药物在所述第一光波长处或在所述第二光波长处的消光系数。

4.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中所述尺寸排阻色谱包括超高效液相色谱、反相超高效液相色谱或高效液相色谱。

5.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中所述样品包括1μg/μL至500μg/μL的抗体-药物缀合物。

6.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中所述抗体是抗-肿瘤抗体。

7.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中所述药物是促凋亡剂、细胞生长抑制剂或细胞毒性剂。

8.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中对吸光度响应的峰进行积分包括检测吸光度响应的每个峰的峰肩。

9.根据权利要求1所述的一种使用尺寸排阻色谱确定包含抗体-药物缀合物的样品中药物与抗体之比的方法，其中所述时间间隔是3分钟至9分钟。