[发明专利]一种拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin及其应用

说明书

提供了一种拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin，采用现有的固相化学合成的方法得到纯度达95％以上的Sparamosin成熟肽及其功能结构域Sparamosin_26‑54，上述肽来源于水产甲壳动物，具有抗菌活性，可以应用于水产作为饲料添加剂，也可以研制成为防霉防腐剂、抗菌剂和抗菌药物等。Sparamosin_26‑54具有抗真菌活性，能抑杀多种酵母真菌和丝状真菌的生长。

技术领域

本发明涉及海洋分子生物学技术领域，特别涉及一种拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin及其应用。

背景技术

抗菌肽(antimicrobial peptide，AMP)是一类广泛存在于自然界生物体中的小分子多肽，具有广谱的抗菌活性，是生物体先天性免疫防御系统的重要组成部分，在机体对抗外界病原微生物感染和自身免疫调节中发挥着重要作用。1981年Boman等从惜古比天蚕中首次发现抗菌肽—天蚕素，此后人们陆续从植物、昆虫、海洋生物、两栖类动物、哺乳动物和微生物等中发现了近3000种抗菌肽。最初人们只发现抗菌肽具有较好的抗细菌活性，1993年日本科学家Iijima等从麻蝇的血淋巴中分离得到一种新型抗菌肽，发现该抗菌肽能够抑制白假丝酵母菌生长，命名其为抗真菌肽。

真菌是一个具有极大多样性的庞大群体，广泛分布于各个生态系统中。目前已经发现大约有200多种真菌是致病菌，此外还有多种真菌可引起粮食、饲料等谷物的霉变，造成了巨大的经济损失。因此研发具有抗真菌活性的抗菌肽在临床药物、防霉防腐剂开发等领域有着极大的潜力。目前对抗真菌肽的抗菌机制也有了一定的认识，主要有以下三种：①抗真菌肽通过与真菌细胞壁组分结合，与细胞壁相互作用，抑制葡聚糖、几丁质等细胞壁重要组分的合成，起到杀真菌作用；②抗真菌肽通过与真菌细胞质膜的磷脂组分结合，裂解细胞质膜或者改变细胞质膜的通透性，起到杀真菌作用；③抗真菌肽通过进入真菌细胞并与胞内线粒体或核酸等胞内物质结合，抑制真菌细胞的正常代谢活动，起到杀真菌作用。

天然抗菌肽通常由12-100个氨基酸组成，具有较好的热稳定性和水溶性，抗菌谱广，能够抑杀细菌和真菌。有些抗菌肽甚至具有抑杀病毒、寄生虫、癌细胞等多种生物活性，而对高等动物正常细胞几乎无毒害作用，且不易使病原菌产生耐药性。近年来，随着越来越多的抗生素耐药性微生物的出现，使得抗菌肽在临床医药等领域具有良好的应用前景。

另外，饲料原料在运输、贮藏过程中，霉菌的大量繁殖会引起饲料发生霉变，饲料中低浓度的霉菌毒素即可对动物造成危害，因而给水产和畜禽饲料业带来很大的经济损失。目前饲料储存加工常用的防霉制剂主要是有机酸、有机酸盐或者酶类等起到抑制或杀死霉菌的作用，但使用有机酸容易造成对设备、料槽等造成的腐蚀，使用酶类制剂则涉及到专一性不高和抑杀真菌的活性不强等问题。目前，将抗菌肽作为饲料原料的抑菌防霉制剂是饲料行业的新热点，研究、开发与应用抗菌肽用于饲料的抑菌防霉，对于保证饲料原料的品质和产品的绿色安全具有重要的意义和应用价值。

本发明根据拟穴青蟹转录组数据库，筛选获得的一个新型抗菌肽基因Sparamosin。采用现有的固相化学合成的方法得到纯度达95％以上的拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin成熟肽及其功能结构域Sparamosin_26-54。发现Sparamosin和Sparamosin_26-54都具有较强的抗菌活性，而Sparamosin_26-54还具有较强的抗真菌活性。本发明为拟穴青蟹内源性抗菌肽Sparamosin和Sparamosin_26-54的首次报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种安全、高效的新型拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin和Sparamosin_26-54及其应用。

本发明的第一目的在于提供一种拟穴青蟹抗菌肽Sparamosin和Sparamosin_26-54的制备方法。