[发明专利]修饰型HSV gB蛋白及包含其的HSV疫苗

说明书

一种修饰型HSV gB蛋白，其为单纯疱疹病毒(HSV)的包膜糖蛋白B(gB)的修饰蛋白，其是使存在于野生型HSV gB的结构域IV及结构域I的诱导非中和抗体的表位(非中和表位)中的至少1个表位失活(去表位化)而成的。

技术领域

本发明涉及修饰型HSV gB蛋白及包含其的HSV疫苗。

背景技术

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus；HSV)为嗜神经性的病原体，在首次感染粘膜上皮后转移到感觉神经，在三叉神经节或骶神经节中终生潜伏感染。潜伏状态的HSV时而会再活化而引起各种病情(非专利文献1)。

已知HSV存在2种血清型(HSV-1、HSV-2)，HSV-1主要为口唇·角膜疱疹的病因，HSV-2主要为生殖器疱疹的病因。但是，近年由于性行为的多样化等，也存在HSV-1屡屡成为生殖器疱疹的病因、HSV-2屡屡成为口唇疱疹的病因的情况。日本的抗体阳性者(已感染者)比率在HSV-1的情况下为60～80％、HSV-2则为10％，即使仅限于HSV-2，推测疫苗的潜在需求也为1000万人(非专利文献2)。另外，美国的抗体阳性者(已感染者)比率在HSV-1的情况下为57％、HSV-2则为20％(其中约10％为明显的生殖器疱疹)(非专利文献3)。

已知在HSV对细胞建立感染中，在吸附和侵入这2个阶段中有5个包膜糖蛋白(glycoprotein)参与。这5个包膜糖蛋白分别被称为包膜糖蛋白B(gB)、包膜糖蛋白C(gC)、包膜糖蛋白D(gD)、包膜糖蛋白H(gH)、包膜糖蛋白L(gL)(非专利文献4)。

首先，gB及gC结合到细胞表面的硫酸乙酰肝素上这一点成为吸附过程的契机(非专利文献5、6)。该过程在HSV侵入细胞时并非必不可少，但是一般认为关系到更有效的侵入。接着，gB及gD与各自的宿主细胞受体结合，病毒包膜与宿主细胞膜融合，从而开始侵入过程。

作为宿主细胞受体，已知有gB受体和gD受体。作为gB受体，已鉴定出NM-IIA(非专利文献7、8)及MAG(非专利文献9)。作为gD受体，已鉴定出结合素1(非专利文献10)、HVEM(非专利文献11)及3-O-硫酸化硫酸乙酰肝素(非专利文献12)。另外，已知gH/gL的杂二聚体与gB及gD相互作用而在膜融合中发挥重要的作用(非专利文献13)。

2006年破解了HSV-1gB的结构，结果获知，gB形成具有5个结构域的三聚体(非专利文献14)。另外，gB的结构采取与作为膜融合蛋白而已知的VSV(Vesicular stomatitisvirus，疱疹性口炎病毒)的gG相似的结构，这一点支持gB为HSV的膜融合蛋白。另外，gB在其它疱疹病毒中也高度保守，可认为其功能在疱疹病毒中是相同的。

引起感染症的病原体大致分为：用现有疫苗可得到充分效果的Class I组病原体和用现有疫苗、病原体感染史无法获得充分的保护性免疫的Class II组病原体。有人指出，Class II组病原体的难以防御的原因在于它们所具有的巧妙的免疫逃逸机制(非专利文献15)。HSV属于Class II组病原体，我们认为这是由于：HSV具有免疫逃逸机制，可巧妙地逃避宿主的免疫反应。关于HSV疫苗的开发，以往一直尝试研究使用减毒活疫苗、佐剂灭活疫苗，但任意情况下T细胞免疫应答及B细胞免疫应答都不充分，与自然感染后获得的不充分的免疫应答水平没有什么差别。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1:Roizman,B.等、Herpes simplex viruses,p.2501-2602.InD.M.Knipe and P.M.Howley(ed.),“Fields Virology”,5th ed.Lippincott Williams&Wilkins,Philadelphia,P.A.2007