[发明专利]结合活性α突触核蛋白的抗体

说明书

提供了结合α‑突触核蛋白和结合tau纤丝的单克隆抗体及其使用方法。单克隆抗体可以是杂交瘤单克隆2F11。还提供了包含单克隆抗体2F11和可接受的药学载体、佐剂、溶媒或赋形剂的组合物。还公开了在有需要的受试者中减少活性α‑突触核蛋白的方法。该方法包括向受试者施用一定量的包含2F11的组合物。单克隆抗体2F11也可用于测定生物样本中的α‑突触核蛋白或tau纤丝的水平。

技术领域

本发明涉及结合α-突触核蛋白的抗体。还描述了使用抗体的方法。

背景技术

帕金森病(PD)是一种神经退行性疾病，影响全球约1000万人，其中约15％的帕金森病患者还患有路易体(DLB)痴呆。这些代表涉及α-突触核蛋白的核心病理学，该蛋白是一种与各种疾病有关的蛋白，但迄今为止，对于其在体内的主要功能仍所知甚少。这些疾病本身的特征是症状范围很广，包括主要运动症状：静止性震颤、运动迟缓、强直、姿势不稳；以及非运动症状，包括嗅觉丧失、便秘、REM行为障碍、情绪障碍和健忘。最近，α-突触核蛋白的聚合也被证明其涉及多系统萎缩(MSA)。除路易体以外，蛋白质蓄积还可导致路易体神经轴突和树突伸长和营养不良。α-突触核蛋白的蓄积和最终沉积可形成路易体的聚合体，在神经元组织中可以显示为10-20μm的包涵体。DLB中，这些形成是广泛的，从而导致与疾病相关的症状。

Tau是一种微管相关蛋白，参与维持轴突转运和神经元完整性，在树突中具有生理作用。Tau蛋白在胶质细胞中也有低水平表达。在成人大脑中，通过MAPT基因的选择性剪接表达6种tau亚型。MAPT基因突变导致与病理性tau蛋白蓄积相关的遗传性疾病。tau病(taupathy)是一种神经退行性疾病，特征为异常tau蛋白在大脑中沉积。神经病理学表型包括阿尔茨海默病、皮克(Pick)病、进行性核上性麻痹、皮质基底变性、额颞叶痴呆、嗜银颗粒病(argyrophilic grain disease)、原发性年龄相关tau病(以前称为仅神经元纤维缠结性痴呆)、球状胶质tau病(Kovacs，G.G，2015，Neuropathol.App.Neurobiol.，41，3-23).阿尔茨海默病的特征是淀粉样斑块和神经元纤维缠结，tau蛋白是主要的缠结成分(Congdon，E.E.和Sigurdsson，E.M.，Nat.Rev.Neurol.，2018年6月12日在线发表，Nature.com/nrneurol)。

传统意义上讲，含α突触核蛋白的路易体与帕金森病相关，含Tau的神经元纤维缠结与阿尔茨海默病和额颞叶痴呆的各种综合征相关。然而，在一系列神经退行性疾病中，α-突触核蛋白和tau病理显著重叠和共存。例如，在较高百分比(60％)的家族性和散发性阿尔茨海默病中发现了α-突触核蛋白聚合体(路易体)，而在帕金森病中观察到了tau聚合体(神经元纤维缠结，NFT)。此外，还观察到路易体和神经元纤维缠结的共定位，因为这些蛋白在体内彼此的聚合产物中发现(Li，X.，等人，2016，J.Mol.Neurosci.60：298-304)。

已知α突触核蛋白可直接结合tau并诱导tau纤丝化(Benussi，L.等人，2005，Exp.Cell Res.308：78-84；Li，X.等人，J.Mol.Neurosci.2016年，分子神经科学期刊60：298-304)。因此，α-突触核蛋白和tau蛋白是易于发生病理性错误折叠和聚合的蛋白。错误折叠启动同源寡聚和聚集级联，最终导致多种神经退行性疾病中聚合的α-突触核蛋白和不溶性蛋白包含物中的Tau在大脑蓄积。(Yan，X等人，2018，Seminars Cell Devel.Biol.可访问网址：doi.org/10.1016/j.semcdb.2018.05.005)。

α-突触核蛋白以三种主要亚型存在，最长为140个氨基酸。虽然小囊泡内含有少量蛋白，并且可以发生胞吐作用，但是α-突触核蛋白是一种细胞质蛋白。该蛋白已在血液和脑脊液中被检测到(Borghi等人，2000；El-Agnaf等人，2006；Kasuga等人，2010)。细胞外α-突触核蛋白可能参与了疾病在脑部的扩散，并导致神经元死亡和炎症(Desplats等人，2009)。