[发明专利]肽连接酶及其用途在审
| 申请号: | 201880024247.3 | 申请日: | 2018-04-10 |
| 公开(公告)号: | CN110582566A | 公开(公告)日: | 2019-12-17 |
| 发明(设计)人: | M·豪沃思;C·M·布敦 | 申请(专利权)人: | 牛津大学创新有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C07K7/08;C07K14/315 |
| 代理公司: | 11728 北京信诺创成知识产权代理有限公司 | 代理人: | 尹吉伟 |
| 地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 氨基酸序列 多肽 脯氨酸 谷氨酸 天冬酰胺残基 氨基酸残基 赖氨酸残基 序列同一性 共价结合 甘氨酸 键形成 缬氨酸 肽标签 异肽 | ||
1.一种多肽,包含:
a)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;或
b)与SEQ ID NO:1所示的序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列,其中所述氨基酸序列包含在位置61处的谷氨酸和以下中的一个或多个:
1)在位置66处的脯氨酸;
2)在位置95处的脯氨酸;
3)在位置96处的甘氨酸;以及
4)在位置97处的缬氨酸,
其中所指定的氨基酸残基在与SEQ ID NO:1中的位置等同的位置,并且其中所述多肽能够促进SEQ ID NO:2的位置9处的赖氨酸残基和SEQ ID NO:3的位置17处的天冬酰胺残基之间的异肽键的形成。
2.根据权利要求1所述的多肽,其中所述多肽包含与SEQ ID NO:1所示的序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列,并且其中所述氨基酸序列包含在位置61处的谷氨酸和以下中的两个或更多个:
1)在位置66处的脯氨酸;
2)在位置95处的脯氨酸;
3)在位置96处的甘氨酸;以及
4)在位置97处的缬氨酸。
3.根据权利要求1或2所述的多肽,其中所述多肽包含与SEQ ID NO:1所示的序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列,并且其中所述氨基酸序列包含在位置61处的谷氨酸和以下中的三个或更多个:
1)在位置66处的脯氨酸;
2)在位置95处的脯氨酸;
3)在位置96处的甘氨酸;以及
4)在位置97处的缬氨酸。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的多肽,其中,所述多肽包含与SEQ ID NO:1所示的序列具有至少80%的序列同一性的氨基酸序列,并且其中所述氨基酸序列包含在位置61处的谷氨酸和以下中的全部:
1)在位置66处的脯氨酸;
2)在位置95处的脯氨酸;
3)在位置96处的甘氨酸;以及
4)在位置97处的缬氨酸。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的多肽,其中所述多肽包含在位置100处的苏氨酸。
6.一种肽标签,包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的多肽或根据权利要求6所述的肽标签,其中,所述多肽或肽标签缀合于核酸分子、蛋白质、肽、小分子有机化合物、荧光团、金属-配体复合物、多糖、纳米颗粒、纳米管、聚合物、细胞、病毒、病毒样颗粒或其组合。
8.根据权利要求1至5中任一项所述的多肽或权利要求6所述的肽标签,其中所述多肽或肽标签固定在固体基质上。
9.一种核酸分子,包含编码根据权利要求1至8中任一项所述的多肽或肽标签的核苷酸序列。
10.一种载体,包含根据权利要求9所述的核酸分子。
11.一种细胞,包含根据权利要求9所述的核酸或根据权利要求10所述的载体。
12.一种生产或表达根据权利要求1至8中任一项所述的多肽和/或肽标签的方法,包括以下步骤:
a)用根据权利要求10所定义的载体转化或转染宿主细胞;
b)在允许表达所述多肽和/或肽标签的条件下培养所述宿主细胞;
c)分离所述多肽和/或肽标签。
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