[发明专利]结核分枝杆菌陪伴蛋白60.1肽及其用途

说明书

本发明涉及可衍生自多肽陪伴蛋白60.1的新型肽及其在医学中、诸如用于预防和/或治疗炎性病况的用途。

本发明涉及可衍生自结核分枝杆菌(Mycobacteria tuberculosis)多肽陪伴蛋白60.1的新型肽及其在医学中、诸如用于预防和/或治疗炎性病况的用途。

国际专利申请公开号WO02/040037公开了包含来自结核分枝杆菌的Cpn60.1(MtCpn60.1)及其编码核酸分子的药物组合物。该申请还公开了许多可衍生自全长多肽的特异性肽片段，其具有相似的生物活性。还公开了这些分子的各种治疗用途，包括治疗和/或预防自身免疫性疾病、变应性疾病、以Th2型免疫应答为典型的病况和与嗜酸性粒细胞增多相关的病况。

国际专利申请公开号WO2009106819公开了一系列可衍生自MtCpn60.1的新型肽，包括称为“肽4”的肽，其具有氨基酸序列：DGSVVVNKVSELPAGHGLNVNTLSYGDLAAD (SEQ IDNO:1)。SEQ ID NO:1表现出抗炎活性，并且已显示其在变应性气道炎症的动物模型中显著减少嗜酸性粒细胞的募集。

WO2013057499公开了SEQ ID NO:1的几个子片段，其显示具有生物活性。

本发明基于以下意外的发现，即SEQ ID NO:1(DGSVVVNKVSELPAGHGLNVNTLSYGDLAAD)的某些新型子片段和变体表现出生物活性和改进的药代动力学概况。本发明的新型肽由于其比较短的氨基酸链长度(其使得它们便于以高产率制备和分离)而尤其适合用于开发作为药物。还表明它们相对于MtCpn60.1及其已知肽片段具有改进的体内生物稳定性。具体而言，本文请求保护的肽具有提高的半衰期。

因此，在本发明的一个方面，本申请提供了分离的或重组的肽分子，其由选自组(i)至(ix)之一的氨基酸序列或其功能等效的片段或变体组成：

其中X不存在或选自β丙氨酸残基、9-氨基-3,6-二氧杂辛酸和乙酰基；或其变体，其包括i(i)至i(iii)中的一种或多种；

i(i) 一个或多个氨基酸残基呈D构象，

i(ii) GLNVNTLSYGD是反向的，或

i(iii) 将羧基末端氨基酸残基转化为伯羧酰胺基团

本发明人已令人惊讶地发现，相对于衍生自上述陪伴蛋白60.1的已知肽，上述肽作为抗炎剂是有效的，同时具有显著提高的血浆半衰期。

本发明的肽是化学或重组合成的，并且具有许多与全长陪伴蛋白60.1不同的化学、结构和功能特性。

“功能等效的”意指任何肽和/或其变体或片段，其具有与由定义的氨基酸序列(i)至(ix)中的一种或多种展现或归因于定义的氨基酸序列(i)至(ix)中的一种或多种的任何功能相同或实质上相似的功能(例如生物活性)。例如，由(i)至(ix)中定义的氨基酸序列组成的肽减少嗜酸性粒细胞和/或嗜中性粒细胞向炎症部位的运输，允许其用于预防和/或治疗各种疾病和病症，包括哮喘、多发性硬化症、克罗恩氏病、类风湿性关节炎和炎性肠病。可以使用常规模型和方法；例如，通过测量敏化(炎症原(inflammogen)-卵清蛋白)或未敏化(炎症原-LPS)动物中的炎症原诱导的嗜酸性粒细胞或嗜中性粒细胞肺内流，测量关于特定生物活性的功能等效性。

“变体”意指具有与上述序列(i)至(ix)具有或66%或更多、诸如70%、75%、80%、85%、90%或95%或更多同一性的氨基酸序列的肽。因此，术语“变体”是指使用例如重组DNA技术产生的与天然存在的分子差异之处在于氨基酸插入、缺失和取代的多肽和肽。可以通过如下找到确定哪些氨基酸残基可以替换、添加或缺失且不消除目标活性的指导：比较特定多肽的序列和同源肽的序列，并使在高同源性区域(保守区)中产生的氨基酸序列变化的数目最小，或用共有序列替换氨基酸。