[发明专利]一种放射性结直肠炎动物模型的建立方法

权利要求书

1.一种放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

S10、将小鼠随机分成两个大组；

S20、正常喂养1-2周，让小鼠适应新的生活环境；

S30、待小鼠长至6-7W后，取3只小鼠处死后，模拟照射时小鼠的体位，计算仰卧位、四肢固定状态下，小鼠结直肠部位到脊柱的深度，取平均值；

S40、制定放射治疗计划；

S50、待小鼠长至6-7W后，称量体重，依次麻醉后固定四肢，按照上述步骤S40的放射治疗计划，用医用直线加速器6MV X射线，依据分组设计不同，采用不同剂量梯度射线单次大剂量照射；

S60、分别放回各自的鼠笼中正常喂养，照射后7天内为小鼠急性放射性结直肠炎时期，期间密切观察小鼠的观察指标，直至喂养至照射后第7天，将小鼠安乐死后，取下小鼠结直肠组织，4％多聚甲醛固定后，常规脱水包埋、切片后进行HE染色、天狼猩红染色，评估结直肠组织病变严重程度；

S70、对于慢性放射性结直肠炎组，在小鼠度过急性放射性结直肠炎后，每5天观察小鼠的观察指标，直至喂养至照射后第6周，将小鼠安乐死后，取下小鼠结直肠组织，4％多聚甲醛固定后，常规脱水包埋、切片后进行HE染色、天狼猩红染色，评估结直肠组织病变严重程度。

2.根据权利要求1所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S10中，所述小鼠为4-5W的C57BL/6雄性小鼠；分组情况如下：急性放射性结直肠炎组：0Gy、12Gy、18Gy、22Gy；慢性放射性结直肠炎组：0Gy、12Gy、18Gy，每个剂量组5-7只小鼠，每组小鼠用特定的鼠笼及水瓶，分开喂养。

3.根据权利要求1所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S40中，放射治疗计划为：照射体位：仰卧位；源皮距100cm，照射深度1.5cm；射线束：X线；能量：6MV；剂量率：500cGy/min；臂架角度：180°；射野面积4×1cm；机器名义剂量：22Gy、18Gy、12Gy、0Gy。

4.根据权利要求3所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S40中，采用小鼠放射性X射线辐照模具进行小鼠行腹部结直肠外照射，用7.9cm厚铅块遮蔽小鼠其他部位，采用两块0.5cm厚的有机玻璃补偿板，使得建成区深度＝两块有机玻璃板的厚度+背部皮肤与结肠之间的距离，使得结肠位于最大深度剂量处；

将小鼠麻醉后固定于活动补偿板上，并调整其腹部位置，使得照射孔的上缘与小鼠肋弓下缘连线平齐，腹部正中放置于照射孔正中。

5.根据权利要求1所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S50中，待小鼠长至6-7W后，称量体重22±1g，采用不同剂量梯度射线单次大剂量照射。

6.根据权利要求1所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S60中，急性放射性结直肠炎实验观察终点为7天，观察指标为小鼠体重变化、饮食情况、及粪便形状，2-3天观察一次，评价模型效果为HE染色、天狼猩红染色。

7.根据权利要求1所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，在步骤S70中，慢性放射性结直肠炎实验观察终点为6周，观察指标为小鼠体重变化、饮食情况、及粪便形状，5天观察一次，评价模型效果为HE染色、天狼猩红染色。

8.根据权利要求4所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，所述小鼠放射性X射线辐照模具包括遮挡铅块，所述遮挡铅块的正中位置开有贯穿遮挡铅块的照射孔；所述遮挡铅块上设有固定补偿板，所述固定补偿板上设有活动补偿板。

9.根据权利要求8所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，所述遮挡铅块的长度为8cm，宽度为7cm，厚度为7.9cm；所述固定补偿板和活动补偿板均为有机玻璃补偿板；所述固定补偿板和活动补偿板的厚度均为0.5cm。

10.根据权利要求8所述的放射性结直肠炎动物模型的建立方法，其特征在于，所述照射孔的长度为4cm，宽度1cm。