[发明专利]一种血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条及其制备方法在审
| 申请号： | 201811641168.5 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109738624A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 李志远;程娜;肖杰;苏柳惠;周鹏;谢威;杨生辰;杨秀珍;邓思浩;卢大华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53;G01N33/531 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 胡素丽;刘明星 |
| 地址： | 510530 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核酸适配体 胶体金 试纸条 包被 血小板衍生生长因子 底板 硝酸纤维素膜 检测线 结合垫 质控线 制备 胶体金标记 药物研究 低成本 生物素 吸水纸 样品垫 粘贴物 种检测 粘贴 筛选 | ||
1.一种血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条，包括底板，所述的底板上依次粘贴有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，两相邻粘贴物之间部分重叠，所述的硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，其特征在于，所述的结合垫上包被有胶体金标记的Apt1-Poly T，所述的Apt1-Poly T为3’端加有Poly T的PDGF-BB的核酸适配体Apt1，所述的检测线上包被有PDGF-BB的核酸适配体Apt2，所述的质控线上包被有3’端标记有生物素的Poly A。
2.根据权利要求1所述的血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条，其特征在于，所述的Apt1-Poly T的核苷酸序列为：5’-AGGGCGCGTTCTTCGTGGTTACTTTTAGTCCCGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT-3’；所述的PDGF-BB的核酸适配体Apt2的核苷酸序列为：5’-CAGGCTACGGCACGTAGAGCATCACCATGATCCTG-3’；所述的Poly A的核苷酸序列为：5’-AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-3’。
3.根据权利要求1所述的血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条，其特征在于，所述的底板为PVC底板。
4.根据权利要求1所述的血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条，其特征在于，所述的检测线和质控线之间的距离为3mm。
5.一种权利要求1-4任一项所述的血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)样品垫的制备：将玻璃纤维膜浸泡在样品垫处理液中，取出干燥，制备得到样品垫；
2)结合垫的制备：用胶体金标记5’端修饰有巯基的Apt1-Poly T，得到胶体金标记的Apt1-Poly T，经封闭、老化后喷到玻璃纤维膜上，干燥，制备得到结合垫；
3)将PDGF-BB的核酸适配体Apt2和3’端标记有生物素的Poly A分别划在硝酸纤维素膜上，以PDGF-BB的核酸适配体Apt2作为检测线，以3’端标记有生物素的Poly A作为质控线；
4)将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次粘贴到底板上，两相邻粘贴物之间部分重叠，得到血小板衍生生长因子PDGF-BB的胶体金核酸适配体试纸条。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的样品垫处理液包括4％TritonX-100、1％BSA、2％蔗糖、2％PEG-4000、100mM硼酸、0.1％SDS和0.5μg/mL鲑鱼精DNA，余量为水，pH 9.0。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的检测线和质控线之间的距离为3mm。
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