[发明专利]一种用于滑液支原体培养的改良培养基

说明书

本发明公开一种用于滑液支原体培养的改良培养基，包含有如下的组分：牛心浸出培养基、酚红、酵母提取液、抗生素、葡萄糖、必需氨基酸、动物血清、β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和半胱氨酸。本发明还公开采用该改良培养基培养和分离滑液支原体的方法。本发明的培养基能够有效提高滑液支原体的分离效果，提高该支原体在培养基中的密度，抑制其它菌种对检验结果的影响，能够做到特异性分离滑液支原体的效果，结果可靠；能够提高检测滑液支原体的灵敏度和缩短培养时间，提高滑液支原体的生存时间，可以作为保存培养基使用；成本低，适用于大规模生产和使用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域的滑液支原体(Mycoplasma Synoviae)培养技术，具体地说，是适用于滑液支原体分离和培养的培养基，从而研究滑液支原体的生物学特性。

背景技术

滑液支原体(Mycoplasma synoviae)是一种革兰氏阴性菌，菌体为多形性球状或干状体，不耐热，低温环境下能长时间存活。主要生化特征为能发酵葡萄糖及麦芽糖、产酸不产气、不发酵乳糖、水杨苷，不水解精氨酸，不利用尿素等。滑液支原体在宿主意外的华景中生存能力很差，对冷、热、酸、干燥及常规消毒剂都很敏感，多种消毒剂都能将其杀死。滑液支原体可引起鸡、火鸡、珍珠鸡的呼吸道疾病和滑膜炎疾病，导致关节的滑液囊膜及腱鞘等发生传染性渗出性滑膜炎、腱鞘滑膜炎及黏液囊炎，同样也会引起鸟类的感染。因此，滑液支原体对家禽养殖业造成了巨大威胁，一旦感染，将会造成鸡的生长发育不良，使得肉鸡胴体品质下降，种鸡的产蛋率、受精率和孵化率下降，将会造成巨大的经济损失。

常规支原体的分离和培养主要采用Frey氏培养基，但是现有培养基条件无法支持滑液支原体的生长，更无法进一步研究滑液支原体的生理学和病理学研究。研发一种适合于滑液支原体生长、代谢和不同的试验生长表达过程中的营养需求的培养基具有重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题之一在于，提供一种适合培养和分离滑液支原体的培养基，能够提高滑液支原培养和分离的可靠性和表达的稳定性，满足对滑液支原体生物学特性的进一步研究，以降低滑液支原体对生产、生活的危害以及带来的巨大经济损失。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

一种用于滑液支原体培养的改良培养基，其包含有如下的组分：牛心浸出培养基、酚红、酵母提取液、抗生素、葡萄糖、必需氨基酸、动物血清、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和半胱氨酸。

在一种具体的实施方式中，每升改良培养基，包含下列配比组分：

牛心浸出培养基20～35g、酚红(0.5％水溶液)4～8mL、酵母提取液(10～20％)75～95mL、抗生素(100000Unites/mL)10～20mL、葡萄糖(质量百分数15～25％)20～45mL、必需氨基酸(质量百分数40～45％)45～70mL、动物血清160～200mL、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0.1～1g和半胱氨酸0.1～1g，余量为水。

在一种具体的实施方式中，所述抗生素为青霉素。

在一种具体的实施方式中，所述必需氨基酸为精氨酸。浓度为40％、41％、42％、43％、44％、45％。

在一种具体的实施方式中，所述酵母提取液的质量百分数为10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％。优选为10％～15％。

在一种具体的实施方式中，所述葡萄糖的质量百分数为15％、16％、17％、18％、19％、、20％、21％、22％、23％、24％、25％。优选为15％～20％。

在一种具体的实施方式中，所述动物血清为猪血清。

在一种具体的实施方式中，所述动物血清为马血清。

在一种具体的实施方式中，所述β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的添加量为0.1g/L。