[发明专利]一种水凝胶负载细胞的3D骨修复支架及其制备方法

权利要求书

1.一种促进血管和骨再生的水凝胶负载细胞的3D骨修复支架，其特征在于：它是由含骨髓间充质干细胞的甲基丙烯酸酐化明胶溶液经交联制备而成；

所述甲基丙烯酸酐化明胶溶液中，骨髓间充质干细胞的密度为2x10⁶个/mL，所述甲基丙烯酸酐化明胶溶液的浓度是5％(w/v)；

所述交联为光交联；所述交联剂的用量为甲基丙烯酸酐化明胶溶液的0.25％(w/v)

所述甲基丙烯酸酐化明胶的制备方法如下：

甲基丙烯酸酐与明胶经过反应、透析和冻干，即得；

其中，甲基丙烯酸酐与明胶的比为5:8(v/w)；

所述甲基丙烯酸酐与明胶的反应为将明胶溶于浓度为10w/v％的CB缓冲液溶液中，40～60℃搅拌至形成均匀的明胶溶液，明胶溶液的浓度为8％(w/v)；并在此条件下将甲基丙烯酸酐逐滴添加到明胶溶液中，反应2～4小时，即得甲基丙烯酸酐化明胶溶液；

和/或，所述透析为将制备得到的甲基丙烯酸酐化明胶溶液置于透析袋中，透析8～12天，每天早晚各换一次水；其中，透析袋的截留分子量为12000～14000。

2.根据权利要求1所述的骨修复支架，其特征在于：所述光交联使用的交联剂为Igucure500。

3.根据权利要求2所述的骨修复支架，其特征在于：所述光交联为紫外光交联。

4.一种制备权利要求1～3任意一项所述的骨修复支架的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

(1)使用去离子水将甲基丙烯酸酐化明胶配制成浓度为5％(w/v)的甲基丙烯酸酐化明胶溶液，并加入光交联剂，混匀混合，得混合溶液，将混合溶液经过0.22微米滤膜过滤，与骨髓间充质干细胞混匀制成细胞悬液；

(2)根据需要构建骨缺损模型，并根据骨缺损模型制备相应尺寸的PDMS模具；

(3)将细胞悬液加入PDMS模具中并给予紫外光照射，交联后，即得。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

步骤(1)中，交联剂的用量为甲基丙烯酸酐化明胶溶液的0.25％(w/v)；

和/或，步骤(1)中，细胞悬液中骨髓间充质干细胞的密度为2x10⁶个/mL。