[发明专利]一种α-葡萄糖基橙皮苷修饰叶黄素脂质体的制备方法

说明书

本发明公开了一种α‑葡萄糖基橙皮苷修饰叶黄素脂质体的制备方法。本发明提供的叶黄素脂质体由α‑葡萄糖基橙皮苷修饰获得，具体方法如下：(1)将叶黄素和脂材溶解，获得叶黄素脂溶液；(2)将所述脂膜水化，经超声后获得分散液；(3)向分散液中滴加α‑葡萄糖基橙皮苷溶液，室温搅拌过夜；(4)将所述分散液过聚碳酸酯膜挤压，获得叶黄素脂质体。本发明α‑葡萄糖基橙皮苷修饰后的叶黄素脂质体具有高稳定性、长效循环的性能，显著提高叶黄素在眼部的吸收。

一、技术领域

本发明属于功能性食品加工技术领域，具体涉及一种α-葡萄糖基橙皮苷修饰叶黄素脂质体的制备方法。

二、背景技术

叶黄素，是一种广泛存在于蔬菜、水果、花卉和某些藻类生物中的天然类胡萝卜素，人体无法自身合成，必须由膳食中摄取或补充。叶黄素是眼睛黄斑色素的主要组成成分之一，具有吸收蓝光、增强视网膜组织的功能，在保护视觉、预防白内障等方面具有显著功效。但叶黄素的分子结构中碳链较长且含有多个疏水基团，使其在水中的溶解性较差，限制了在食品、药品等领域的应用。

将叶黄素通过微胶囊技术、纳米自乳化载体、纳米乳化复合体系及脂质体等形式包埋，是提高其溶解性、对外界环境的耐受性以及生物利用率的有效手段。以脂质体形式包埋叶黄素，制备工艺简单，具有较高的载量和包封率。脂质体载药后主要被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，但由于脂质体膜结构类似于生物膜，其易被体内的单核巨噬细胞系统和网状内皮系统清除。有研究发现，在磷脂分子上联接含多羟基基团的物质，使脂质体表面暴露一些亲水性的多糖或多羟基基团等方式，可以增加脂质体在血液中的稳定性。当立体位阻和提高膜表面的亲水性两个因素共同作用时，该脂质体形成一种长效脂质体。现有研究中，常采用兼有亲水性和柔顺性的聚乙二醇(PEG)高分子修饰脂质体表面，阻碍血浆成分与脂质体表面的吸附，使脂质体在体循环中的时间延长。如中国专利CN101843584B公开了一种全反式维甲酸与脂质体的复合物及应用，该复合物在血清体系中具有较好的稳定性。但是长期使用PEG修饰后的脂质体，会使人体产生anti-PEG IgG，PEG的免疫原性会引起明显的体液免疫反应，导致PEG修饰的脂质体血液半衰期显著缩短。因此寻找能长效循环且安全无毒的PEG的替代品，将有效提高脂质体的靶向定位和生物效价。

本发明以α-葡萄糖基橙皮苷修饰叶黄素脂质体，将α-葡萄糖基橙皮苷通过自组装包覆于叶黄素脂质体表面，α-葡萄糖基橙皮苷疏水头部定位于脂质体头部，亲水端糖苷基团暴露在脂质体表面。制备得到α-葡萄糖基橙皮苷-叶黄素脂质体安全无毒，且具有高稳定性、长效循环的性能，将有助于改善叶黄素脂质体体内外稳定性、延长体内循环时间，降低叶黄素在肝脏及脾的积累，显著提高叶黄素在眼部的吸收。

三、发明内容

本发明的目的在于提供一种α-葡萄糖基橙皮苷修饰叶黄素脂质体的制备方法，该方法制备的叶黄素脂质体稳定性好、长效循环性好、生物安全性高。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案是：

(1)将叶黄素、脂相溶解于体积比为2∶1的三氯甲烷-甲醇溶液中，得到叶黄素脂溶液。

(2)旋转蒸发除去有机溶剂，使复合物在圆底烧瓶底部形成均匀薄膜，提高真空度至0.1MPa继续抽干30min。

(3)向步骤(2)所获得的复合物薄膜中加入磷酸盐溶液水化，水化温度40～60℃，时间30～120min；

(5)在冰水浴搅拌条件下超声，超声功率800W，脉冲5s/5s，处理时间10～30min后，30～40℃温度下继续搅拌3～6h，搅拌转速800～1200r/min；

(6)将步骤(5)得到的分散液10000r/min速度条件下离心10min，除去未包埋的叶黄素；

(7)α-葡萄糖基橙皮苷溶解于磷酸盐溶液中，得到质量浓度为0.5～10％的α-葡萄糖基橙皮苷溶液，向步骤(6)得到的分散液中滴加α-葡萄糖基橙皮苷溶液，室温搅拌过夜；