[发明专利]使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用在审
申请号: | 201811577186.1 | 申请日: | 2018-12-24 |
公开(公告)号: | CN109554338A | 公开(公告)日: | 2019-04-02 |
发明(设计)人: | 李喜和;苏杰 | 申请(专利权)人: | 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司;内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 011517 内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精子 分离效率 流式细胞仪 流式细胞 动物繁殖技术 精子活力 去除 应用 | ||
1.一种使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用,其特征在于:用于提高精子流式细胞分离效率。
2.一种权利要求1使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的percoll试剂的制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:
(1)配制试剂:
1)10×精子稀释液:
2)精子稀释液:1ml 10×精子稀释液+9ml水
3)90%percoll:9ml percoll+1ml 10×精子稀释液
4)45%percoll:等体积90%percoll+等体积10×精子稀释液
5)精子分离液:离心管先加入5ml 90%percoll,再加入5ml 45%percoll。
3.根据权利要求1所述使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用,其特征在于:它包括以下步骤:
(1)精液检测:使用假阴道法采精,精液为乳白色,无异味,镜下检测活力,并检测精液密度、活力;
(2)取适量精液,放入精子分离液中,800g离心30min;
(3)上清吸去,底部沉淀加入5ml精子稀释液,轻轻混匀,1500rpm,5min,吸去上清;
(4)加入3-5ml精子稀释液,1500rpm,5min,吸去上清,精子染色后使用流式细胞仪分离。
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