[发明专利]使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用在审

专利信息
申请号: 201811577186.1 申请日: 2018-12-24
公开(公告)号: CN109554338A 公开(公告)日: 2019-04-02
发明(设计)人: 李喜和;苏杰 申请(专利权)人: 内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司;内蒙古赛科星繁育生物技术(集团)股份有限公司
主分类号: C12N5/076 分类号: C12N5/076
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 011517 内蒙古自治区呼和浩特市和林格尔*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要:
搜索关键词: 精子 分离效率 流式细胞仪 流式细胞 动物繁殖技术 精子活力 去除 应用
【权利要求书】:

1.一种使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用,其特征在于:用于提高精子流式细胞分离效率。

2.一种权利要求1使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的percoll试剂的制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:

(1)配制试剂:

1)10×精子稀释液:

2)精子稀释液:1ml 10×精子稀释液+9ml水

3)90%percoll:9ml percoll+1ml 10×精子稀释液

4)45%percoll:等体积90%percoll+等体积10×精子稀释液

5)精子分离液:离心管先加入5ml 90%percoll,再加入5ml 45%percoll。

3.根据权利要求1所述使用percoll提高精子流式细胞仪分离效率的应用,其特征在于:它包括以下步骤:

(1)精液检测:使用假阴道法采精,精液为乳白色,无异味,镜下检测活力,并检测精液密度、活力;

(2)取适量精液,放入精子分离液中,800g离心30min;

(3)上清吸去,底部沉淀加入5ml精子稀释液,轻轻混匀,1500rpm,5min,吸去上清;

(4)加入3-5ml精子稀释液,1500rpm,5min,吸去上清,精子染色后使用流式细胞仪分离。

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