[发明专利]一种校准品稳定剂、测定C肽的检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明属于生物医学检验技术领域，具体为一种校准品稳定剂、测定C肽检测试剂盒及检测方法。试剂盒包括校准品、试剂1、试剂2、试剂R3和试剂R4。该试剂盒利用吖啶酯标记抗C肽抗体、抗原、辣根过氧化物酶标记抗C肽抗体形成抗体‑抗原‑抗体复合物，无需洗涤过程，加入触发剂后立即连续检测一段时间，每次间隔0.02～0.05S，计算其峰面积，用已知浓度的C肽与计算出的峰面积作出剂量‑反应曲线，通过该曲线推算出待测样品的C肽含量。本发明提供的采用空间临近化学发光法检测C肽的试剂盒具有校准品稳定性强、试剂抗干扰能力强、准确度高、特异性好和线性范围宽的优点，结合仪器测量，适合各个层次的医疗和研究机构使用。

技术领域

本发明属于生物医学检验技术领域，具体涉及一种校准品稳定剂、测定C肽检测试剂盒及检测方法。

背景技术

C肽是胰岛β细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体—胰岛素原。一个分子的胰岛素原在特殊的作用下，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C肽，因此在理论上C肽和胰岛素是等同分泌的，血中游离的C肽生理功能尚不很清楚，但C肽不被肝脏破坏，半衰期较胰岛素明显为长，故测定C肽水平更能反应β细胞合成与释放胰岛素功能。

对已经用胰岛素治疗的病人，体内产生的胰岛素抗体可干扰胰岛素测定；同时现在采用的放免法测定胰岛素，也分辨不出是内生的还是外源性胰岛素，给了解β细胞的功能带来困难，而C肽与胰岛素之间有相当稳定的比例关系，且不受胰岛素抗体的干扰，注射的外源性胰岛素又不含C肽，所以测定血中C肽水平，可以反应内生胰岛素的水平，即可了解β细胞的功能。

检测C肽对糖尿病预防和治疗具有重要的临床意义：

(1)测定C肽，有助于糖尿病的临床分型，有助于了解患者的胰岛功能。

(2)因为C肽不受胰岛素抗体干扰，对接受胰岛素治疗的患者，可直接测定C肽浓度，以判定患者的胰岛β细胞功能。

(3)可鉴别低血糖的原因。若C肽超过正常，可认为是胰岛素分泌过多所致，如C肽低于正常，则为其它原因所致。

(4)C肽测定有助于胰岛细胞瘤的诊断及判断胰岛素瘤手术效果，胰岛素瘤血中C肽水平偏高，若手术后血中C肽水平仍高，说明有残留的瘤组织，若随访中C肽水平不断上升，揭示肿瘤有复发或转移的可能。

目前实验室检测C肽的方法比较多，常用方法有放射免疫分析法、酶联免疫分析法、化学发光免疫分析法、电化学发光免疫分析法等。随着生物科技的发展，其检测方法也逐步由放射免疫学的检测方法，逐渐向酶联免疫吸附试验、化学发光免疫分析法发展。放射性免疫分析法由于试剂具有放射性，对操作者具有一定的危害，且操作复杂，试剂有效期短等缺点，不推荐作为C肽临床诊断；酶联免疫分析法的缺点在于无法准确进行定量，且批间差异较大，线性范围有限，无法持续监控C肽水平；化学发光免疫分析法是一种较为先进的免疫学方法，具有高灵敏、高特异、快速、高通量等特点。现阶段化学发光法已成为检测C肽水平的主流方法，并且由于自动化检测系统的普及，极大地提升了实验的精密度。根据目前C肽的临床的应用情况，市场应用前景较好的可靠方法为化学发光免疫分析法。

化学发光免疫分析法主要有微孔板式化学发光、微孔板式磁颗粒化学发光、时间分辨荧光免疫分析法和光激化学发光法。

其中微孔板式磁颗粒化学发光法特征是，在微孔板上使用磁颗粒，将亲和素～生物素侨联方法包被抗体，加入抗原和酶标抗体形成抗体～抗原～酶标抗体复合物，将微孔板置于带有磁分离器的微孔板洗板机上洗涤，加入化学发光底物反应，而后检测其发光强度(RLU)，C肽浓度与发光强度(RLU)成正相关。该方法具有检测范围宽，操作简单等特点，但需要洗涤过程，会产生大量的废弃物，且反应时间较长，不利于临床上大批量快速检测的需求。