[发明专利]一种柑桔内生真菌及其应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种柑桔内生真菌，本发明从柑桔叶片中脉中分离到一株柑桔内生真菌，经微生物分类学鉴定、命名为Hypoxylon sp.nov，该菌株已保藏，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.16095，保藏日期为2018年8月8日。本发明还提供了所述柑桔内生真菌抑制柑桔黑点病致病菌的应用。本发明提供的柑桔内生真菌，可用于防治柑桔黑点病，抑菌率可以达到68％以上，该方法绿色环保，同时避免了致病菌株产生抗药及耐药性。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种柑桔内生真菌及其应用。

背景技术

柑桔黑点病是目前我国柑桔上发生最普遍、危害比较严重的病害，对果实的外观品质影响非常大。柑桔黑点病是由柑桔间座壳菌 Dia-porthe citri 引起，目前的防治方法主要是化学农药代森锰锌，使用化学农药对环境不友好，对人的健康也有潜在危害，而且，大量及单一施用代森锰锌使有些菌株产生了抗药及耐药性。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种新的柑桔内生真菌，并用于抑制柑桔黑点病的致病菌，防治柑桔黑点病。

本发明从柑桔叶片中脉中分离到一株柑桔内生真菌，经微生物分类学鉴定、命名为Hypoxylon sp.nov，该菌株已保藏，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址 ：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编 ：100101；保藏编号为CGMCCNo.16095，保藏日期为2018年8月8日。

本发明所述的柑桔内生真菌的固体培养特征为：在马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) 培养基上28℃培养，一周可以长满整个培养皿（Φ90mm），初期菌落呈现白色，中期菌落呈现咖啡色，后期呈现深褐色，绒毛状平铺于培养基表面。

本发明所述的柑桔内生真菌的碱基系列如下所示：

ITS (internal transcribed spacer)序列5'-3'

GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTCTCCGTTGGTGAACCAGCGGAGGGATCATTACTGAGTTATTAAAACTCCAAACCCTTTGTGAACCTTACCGTCGTTGCCTCGGCGTGAGCTACGGCTACCCTGTAGTTACCCTATAGTTACCCTGTAGTTACCCTGTAGTTACCCTGCAGCTACCCTATAGTTACCCTGTAGTTACCCTGTAGTTACCCTGCAGCTACCCTATAGTTACCCTGTAGCTACCCTGTAGCCGGCTTATGGCCCGCCGAAGGACCGCCAAACTCTTGTTTTTTATTACTGTTTCTCTGAATTGTAAACCTAAATAAGTTAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCATTAGTATTCTAGTGGGCATGCCTATTCGAGCGTCATTTCGACCCTTAAGCCCTTGTTGCTTAGCGTTGGGAATCTACGGCGTAGTTCCTCAAAGTTAGTGGCGGAGTTAGGGTACACTCTCAGCGTAGTAATCTCTCTCGCTCGTGTGGTGGCCCTGGCTGCTAGCCGTTAAACCCCTATATTTTCTAGTGGTTGACCTCGGATTAGGTAGGAATACCCGCTGAACTTAAGCATATCAATAAGCGGAGGA

Act( actin gene)蛋白基因序列5'-3'

ATGTGCAAGGCCGGTTTCGCCGGTGATGATGCTCCCCGAGCTGTCTTCCG

TAAGTGCCATCCTCGCCCAACCGCCCCCGCTTGAGCCCCATCATGGTGGC