[发明专利]一种制备土生鳞伞菌丝体的方法及其培养装置

说明书

本发明公开一种制备土生鳞伞菌丝体的方法及其培养装置，通过1)选料；2)组织块制作；3)转管培养；4)母种选取；5)一级培养；6)二级培养；7)获得土生鳞伞菌丝体，整个操作工艺可进行可大大缩短土生鳞伞菌丝体的培养周期，产率也得到提高，并且无复杂的操作工艺，同时减少了外界环境对培养菌丝体的影响。同时本发明提供的培养装置，方便菌丝体的摇床培养，可实现大规模生产。

技术领域

本发明涉及生物菌丝体培养技术领域，具体涉及一种制备土生鳞伞菌丝体的方法及其培养装置。

背景技术

一直以来，伞菌在泛指肉质伞状真菌，既包括鸡油菌目、蘑菇目，也包括红菇目和牛肝菌目的真菌。在系统演化上，虽然这些真菌可能是多元起源的，但由于此类真菌醒目众多且有重要经济价值，所以，很早就受到菌物学家们的重视。

土生鳞是一种大型真菌子实体所具有的潜在的真菌，大孢蘑菇作为生物媳妇剂吸附Cu²⁺和Cd2+的吸附率高于细菌。菌丝体指的是由许多菌丝连结在一起组成的营养体类型。菌丝体是菌丝集合在一起构成一定的宏观结构。菌丝体是可以肉眼看见的，如：放久的馒头长出来的黑色绒毛状真菌。

由于土生鳞菌丝体在生长条件较为苛刻，导致菌丝体的产率较少，同时土生鳞菌丝体的培养周期较长，难以实现大规模推广，其实际的使用和利用价值受到极大限制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备土生鳞伞菌丝体的方法及其培养装置，解决了现有技术中存在的产率较少，培养周期较长的问题。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种制备土生鳞伞菌丝体的方法，操作步骤如下：

1)选料：选取形状完好、无虫害的土生鳞伞子实体，采用组织分离法，在真空无氧条件下降土生鳞伞子实体用浓度为80％的酒精溶液浸泡消毒，备用；

2)组织块制作：将消毒后的土生鳞伞子实体沿着内部断面的轴向切割为3-5mm的组织块，并放到培养基中培养；

3)转管培养：待到母种的菌丝萌芽后，取菌丝的前端进行转管提纯培养，依次经过6-7次提纯，每次培养和时间为3-4天；

4)母种选取：选择无空泡的菌丝作为母种；

5)一级培养：将母种装入到发酵液中，在23-25℃的温度下，旋转式摇床150r/min，培养5-7天，获得一级菌种；

6)二级培养：在密封袋装入培养料，并将一级菌种装入密封袋中，在23-25℃的温度下，旋转式摇床120r/min，培养25-30天，并控制空气相对湿度为50-60％，获得二级菌种。

7)获得土生鳞伞菌丝体：用去离子水冲洗二级菌种，并在50-55℃烘干，粉碎，过60目筛，即得土生鳞伞菌丝体。

进一步的，所述培养基的组分为：蛋白胨10-20份、酵母膏1-3份、麦麸5-7份、黄豆粉5-10份、蔗糖1-5份、磷酸二氢钾1-3份、维生素B15-8份。

进一步的，所述培养基的制备方法为：

a、将麦麸用纯水浸泡12-24小时，取出晾干；

b、将晾干后的麦麸放置蒸炉中蒸2-3小时，并控制蒸压为2MPa，取出冷却至室温；

c、将步骤2)处理的麦麸按重量份添加黄豆粉、蔗糖、磷酸二氢钾、维生素B1搅拌混合，再添加蛋白胨、酵母膏再次搅拌混合，并控制pH值为7.2-7.8，冷却静置至室温，灭菌后，并于真空环境下保藏。

进一步的，所述发酵液的组分为：羧甲基壳聚酸1-4份、葡萄糖2-4份、磷酸氢二钾1-3份、维生素B13-5份、硫酸镁2-5份、赤霉素2-5份、黄豆粉12-15份、玉米粉12-15份、酵母膏5-7份。