[发明专利]一类生产L-茶氨酸的菌群及其应用在审
| 申请号： | 201811545381.6 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN109439596A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 孙俊;常慢慢;宛晓春;张照亮;张正竹 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12P13/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 合肥昊晟德专利代理事务所(普通合伙) 34153 | 代理人： | 王林 |
| 地址： | 230000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 茶氨酸 菌群 茶树 分泌 谷氨酰胺 内生菌 乙胺 合成 生产 对数生长期 工业化应用 高效合成 黄单胞菌 生产效率 无菌组织 培养基 杆菌属 实验组 底物 藤黄 应用 生长 检测 | ||
1.一类生产L-茶氨酸的菌群，其特征在于，该菌群为从茶树无菌组织培养苗中分离到的茶树内生菌。
2.根据权利要求1所述的生产L-茶氨酸的菌群，其特征在于，分离法为：取数片茶树组培苗叶片，用剪刀剪成0.5cm×1.0cm的片状后，随机斜插入固体LB培养基中，封口膜封口，28℃恒温培养箱倒置培养2-3天，待叶片周围长出丰富的菌群后，将其接种到液体LB培养基中进行继续培养，所获得的菌群即为生产L-茶氨酸的菌群。
3.根据权利要求2所述的生产L-茶氨酸的菌群，其特征在于，所述的茶树品种为安徽省茶树品种“舒茶早”、云南省茶树大叶种“云抗10号”、浙江省茶树品种“龙井43”和“乌牛早”。
4.根据权利要求1或2所述的生产L-茶氨酸的菌群，其特征在于，所述的菌群为黄单胞菌科藤黄杆菌属。
5.权利要求1或2所述的菌群在生产L-茶氨酸中的应用。
6.一种生产L-茶氨酸的方法，其特征在于，步骤如下：
1)取数片茶树无菌组培苗叶片，用剪刀剪成0.5cm×1.0cm的片状后，随机斜插入固体LB培养基中，封口膜封口，28℃恒温培养箱倒置培养2-3天，待叶片周围长出丰富的菌群后，将其接种到液体LB培养基中进行继续培养；
2)将菌群在28℃振荡培养至OD600为1.0时，向培养液中同时添加终浓度为20mM谷氨酰胺和20mM乙胺，培养7d以上；
3)取得的培养液100℃水浴裂解30min，并于-20℃反复冻融2～3次后，12000rpm，离心15min，获得富含L-茶氨酸的上清液。
7.根据权利要求7所述的生产L-茶氨酸的方法，其特征在于，步骤2)中，培养10天以上。
8.根据权利要求7所述的生产L-茶氨酸的方法，其特征在于，所述的茶树品种为安徽省茶树品种“舒茶早”、云南省茶树大叶种“云抗10号”、浙江省茶树品种“龙井43”和“乌牛早”。
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