[发明专利]中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法

说明书

本发明涉及中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，以吴茱萸为原料，制备吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法：取原料，加入一定量的溶剂，通过过滤萃取进行提取，回收溶剂先过一边中压层析柱，然后将提取液上到中压制备色谱上，同时纯化得到高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱，再用进行结晶，最终得到高纯度的吴茱萸碱和吴茱萸次碱晶体。本发明的目的是为了提供一种生产工艺简单、成本低、易于工业化的方法，吴茱萸碱和吴茱萸次碱纯度均达99％以上，收率大于70％。

技术领域

本发明涉及色谱技术领域，具体的说，是一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

背景技术

吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Evodia rutaecarpa(Juss.)Benth.、石虎Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.officinalis(Dode)Huang或疏毛吴茱萸Evodiarutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang的干燥近成熟果实，具有散寒止痛、降逆止呕、助阳止泻之功效，主治厥阴头痛、寒疝腹痛、寒湿脚气、经行腹痛、脘腹胀痛、呕吐吞酸、五更泄泻；外治口疮、高血压。吴茱萸所含化学成分复杂，有生物碱类、柠檬苦素类、挥发油类、脂肪酸类、氨基酸类等。其中吴茱萸生物碱为其主要药效成分，吴茱萸生物碱中，又以吴茱萸碱和次碱为主要生物碱。吴茱萸碱和吴茱萸次碱有镇痛、抗炎、止呕、扩张血管及强心等作用，吴茱萸次碱还有抗胃黏膜损伤的作用。吴茱萸碱在吴茱萸中含量为0.4％左右，吴茱萸中含有挥发油和果糖，提取分离吴茱萸碱难度较大。目前提取纯化吴茱萸碱方法多是乙醇回流提取氨化或乙醇回流提取，硅胶柱分离。也有一些现代化手段运用很大程度简化了工艺方法，如《中国医院药学杂志》2003第23巻刘文等发表了超临界流体萃取吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱，该方法用乙醇做夹带提取，提高了效率。但是超临界提取对设备要求比较严格而不易工业化。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其具体步骤为：

步骤(1):首先将吴茱萸粉碎成末状后，用筛子筛取透过的的吴茱萸粉末，将吴茱萸粉末加入到醇溶剂，加热回流数次，经过滤除渣，滤液减压回收除去醇溶剂后，得到水悬浮液；

吴茱萸粉末与醇溶剂的质量1:10；

步骤(2):溶剂萃取将步骤(1)所得水悬浮液，先用2-5体积的石油醚萃取，所得下层水相含有吴茱萸碱和吴茱萸次碱组分，下层水相再用氯仿或者二氯甲烷萃取，每次用量按体积比萃取数次，石油醚层回收，石油醚下层弃去，合并氯仿或者二氯甲烷层萃取液，在30-40℃温度下经减压浓縮得到黑色浓浸膏；

步骤(3):色谱柱层析将步骤(2)所得的黑色浓浸膏甲醇溶解干法拌样后进行中压色谱柱层析；梯度洗脱所选用的洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯的混合溶剂，所述石油醚:乙酸乙酯的体积比在50:1到50:50之间，按体积比由高到低，分段收集半成品；

步骤(4)：将步骤(3)分段收集的半成品合并后，加入甲醇至刚好溶解，再经中压制备色谱进行梯度洗脱得到吴茱萸碱和吴茱萸次碱馏分，梯度洗脱所选用的洗脱剂为有机相和水的混合溶剂，其中有机相与水相比例在30:70到90:10之间,有机相主要为甲醇、乙腈和乙醇；

步骤(5)：将步骤(4)馏分分别经过减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，即得高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱。

本发明为一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其进一步优选的技术方案如下：