[发明专利]中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法

权利要求书

1.一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其特征在于，其具体步骤为：

步骤(1):首先将吴茱萸粉碎成末状后，用筛子筛取透过的的吴茱萸粉末，将吴茱萸粉末加入到醇溶剂，加热回流数次，经过滤除渣，滤液减压回收除去醇溶剂后，得到水悬浮液；

步骤(2):溶剂萃取将步骤(1)所得水悬浮液，先用2-5体积的石油醚萃取，所得下层水相含有吴茱萸碱和吴茱萸次碱组分，下层水相再用氯仿或者二氯甲烷萃取，每次用量按体积比萃取数次，石油醚层回收，石油醚下层弃去，合并氯仿或者二氯甲烷层萃取液，在30-40℃温度下经减压浓縮得到黑色浓浸膏；

步骤(3):色谱柱层析将步骤(2)所得的黑色浓浸膏甲醇溶解干法拌样后进行中压色谱柱层析；梯度洗脱所选用的洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯的混合溶剂，所述石油醚:乙酸乙酯的体积比在50:1到50:50之间，按体积比由高到低，分段收集半成品；

步骤(4)：将步骤(3)分段收集的半成品合并后，加入甲醇至刚好溶解，再经中压制备色谱进行梯度洗脱得到吴茱萸碱和吴茱萸次碱馏分，梯度洗脱所选用的洗脱剂为有机相和水的混合溶剂；

步骤(5)：将步骤(4)馏分分别经过减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，即得高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱。

2.如权利要求1所述的一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其特征在于，吴茱萸粉末与醇溶剂的质量1:10。

3.如权利要求1所述的一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其特征在于，有机相与水相比例在30:70到90:10之间,有机相主要为甲醇、乙腈和乙醇。

4.如权利要求1所述的一种中压制备色谱且纯化高纯吴茱萸碱和吴茱萸次碱的方法，其特征在于，

(1)将吴茱萸粉末按质量1:10的比例溶于95％乙醇水溶液中，60℃加热回流3次，每次2小时，经过滤除渣，再用50微米滤膜过滤，滤液减压回收除去乙醇溶剂后，得到粗提液；

(2)所得粗提液先用2倍体积比的石油醚萃取，下层水相再用5倍体积的二氯甲烷萃取，萃取5次，石油醚层回收石油醚下层弃去，合并二氯甲烷层萃取液，35℃经减压浓縮得到黑色浓浸膏；

(3)将所得的黑色浓浸膏用甲醇溶解干法拌样后进行中压色谱柱层析，上样到直径50mm、粒径300目的硅胶柱，用石油醚:乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，其中流动相A:石油醚，流动相B:乙酸乙酯；洗脱梯度为初始梯度5％B保留5min，然后40min至50％，根据出峰情况分段收集半成品；

(4)收集的组分，以反相十八烷基硅垸键合硅胶为固定相；检测波长为225nm进行线性洗脱，其中流动相A:水，流动相B:甲醇；洗脱梯度为初始梯度50％B，然后60min至90％B，分别含有吴茱萸碱和吴茱萸次碱的馏分；

(5)将含有有吴茱萸碱和吴茱萸次碱的馏分分别经过减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，即得；所用旋转蒸发仪旋蒸水浴温度在30℃至35℃，真空度在-0.09Mbar；所得水溶液经过-50℃预冻，再进行冻干处理得到纯度99％以上的吴茱萸碱和吴茱萸次碱样品。