[发明专利]体外免疫突触系统及其用于体外评估免疫反应的方法

说明书

本发明涉及一种体外免疫突触系统及其用于体外评估免疫反应的方法。体外免疫突触系统包含源自同一猪只个体的抗原呈现细胞，以及由周边血液单核球细胞分离的特定数个T细胞亚群的至少一个。当待测样品与前述体外免疫突触系统进行共培养步骤达一段预设时间后，由上述细胞的免疫相关变化程度，可判断待测样品是否具有免疫原性或免疫刺激性，进而有潜力取代某些动物实验。

【技术领域】

本发明涉及一种体外仿真免疫系统及其用于评估免疫反应的方法，特别涉及一种利用多种免疫细胞体外评估免疫反应的免疫突触系统及其体外评估免疫反应的方法。

【背景技术】

疫苗为控制所有疾病的最佳策略，因此开发安全有效又可及时供应的疫苗以防御病原，实为全球公共健康的首要关键议题。

目前开发动物疫苗仍须经过动物实验测试及筛选，方能找出免疫效果较佳的抗原与佐剂。然而，开发疫苗与免疫佐剂所需的动物实验，其成本所费不赀。其次，利用动物实验开发疫苗，又受限于动物免疫系统具有种别特异性，一种动物与病原间的实验结果，不一定适用于其他种别的动物或其他病原。

目前市面上虽有一些体外细胞评估平台，不过上述平台的细胞多以小鼠或商业取得的细胞株为细胞来源，由此评估的结果目前仍无法取代动物实验。

申言之，小鼠的体型较小，每头小鼠能取得的免疫细胞数量相当有限，必须集合来自不同个体的免疫细胞，才足够进行测试。然而，来自不同个体且不同种类的免疫细胞一起共培养，容易引起各种免疫排斥反应，因此针对来自不同个体的免疫细胞，仅能以同一种类的免疫细胞进行评估，无法进行T细胞抗原决定位的评估。

至于商业取得的免疫细胞株，虽然细胞数量足够，但这类细胞株不是初代细胞，其细胞生理代谢及免疫反应等已有别于正常细胞，由此所得的免疫反应结果，其可信度也较低。

有鉴于此，亟需发展一种体外评估免疫反应的系统，藉以克服习知体外细胞实验的种种缺点，进而取代动物实验。

【发明内容】

因此，本发明的一个目的是提供一种体外免疫突触系统，其包含源自同一猪只个体的抗原呈现细胞，以及由外周血单核细胞分离的特定数个T细胞亚群的至少一种。

本发明的又一目的是提供一种体外评估免疫反应的方法，其是令待测样品与上述体外免疫突触系统进行共培养步骤达一段时间后，检测免疫突触系统的免疫相关变化，以判断待测样品是否具有免疫原性或免疫刺激性，进而取代动物实验。

根据本发明的上述目的，提出一种体外免疫突触系统，其包含抗原呈现细胞，以及调节性T细胞、杀手细胞以及辅助型T细胞的至少一种。前述抗原呈现细胞、调节性T细胞、杀手细胞及辅助型T细胞为源自同一个体的初代细胞，且抗原呈现细胞的细胞数可例如为大于调节性T细胞、杀手细胞及辅助型T细胞的细胞数总和。

依据本发明一实施例，上述同一个体为无特定病原(specific pathogen free；SPF)猪。

依据本发明一实施例，上述抗原呈现细胞可例如为肺泡巨噬细胞。

根据本发明的另一目的，提出一种体外评估免疫反应的方法。在一实施例中，首先，提供上述体外免疫突触系统，其中体外免疫突触系统包含例如抗原呈现细胞，调节性T细胞、杀手细胞与辅助型T细胞的至少一种，以及控制细胞，且抗原呈现细胞、调节性T细胞、杀手细胞、辅助型T细胞以及控制细胞 (对照细胞)为源自同一个体的初代细胞。接着，令待测样品与前述免疫突触系统进行共培养步骤达24小时至48小时。然后，检测前述免疫突触系统的免疫相关变化，其中免疫相关变化可例如TLR基因表达及/或细胞激素浓度。当调节性T细胞、杀手细胞、辅助型T细胞的任一者的免疫相关变化，与控制细胞的免疫相关变化相较具有显著差异时，则判断待测样品具有免疫原性或免疫刺激性。

依据本发明一实施例，上述待测样品可例如为抗原或佐剂。