[发明专利]一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法

权利要求书

1.一种生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取适量微藻放在固体培养基中培养10-15天，然后从固体培养基表面刮取微藻放入温水中，并通过离心处理分离得到高纯度微藻；

2)将高纯度微藻放入纯净水中，然后加入体积为纯净水体积5％的磷酸盐缓冲液和重量为高纯度微藻质量0.5％的蛋白酶，搅拌反应体系并加热至45-50℃，反应0.5h后继续升温至100℃煮沸10min；

3)将煮沸后的反应溶液快速降温至50-60℃，并加入重量为高纯度微藻质量0.6％-1％的复合酶反应0.5-2h，然后采用超声波对复合酶反应后的溶液处理10min-20min；

4)向超声处理后的溶液中加入体积为溶液60％-80％的萃取剂，并在6000-8000rpm的转速下离心3-5min后，取上油脂层进行蒸馏得到微藻油脂。

2.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤1中培养温度为25℃，光照强度为4000-6000lx。

3.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤1中离心处理的转速为1200-2000rpm，处理时间为10-20min。

4.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤2中的蛋白酶的酶活性为30000-40000U/g。

5.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤3中的复合酶为纤维素酶、淀粉酶、酯酶、甘露聚糖酶以及果胶酶组成的复合物，其质量比为2：1：1：1：1。

6.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤3中的超声功率为120-140W。

7.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤4中的萃取剂为正己烷、甲醇、氯仿、乙醚中的一种或几种组成。

8.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述步骤4中蒸馏为在10KPa-100KPa的压强下进行减压蒸馏，其蒸馏沸点为45-65℃。

9.根据权利要求1所述的生物酶催化破壁提取微藻油脂的方法，其特征在于，所述微藻为小球藻、绿藻、轮藻、甲藻、金藻或硅藻其中的一种。