[发明专利]一种O-酰基化卡拉胶寡糖螯合亚铁及其制备方法

说明书

本发明提供一种O‑酰基化卡拉胶寡糖螯合亚铁的制备方法，首先将卡拉胶降解为寡糖，再以二元酸酐为酰化剂，通过二者之间的单酰化反应，在卡拉胶寡糖分子中引入自由羧基，然后使卡拉胶寡糖分子中的自由羧基与亚铁盐进行螯合而制得。本发明的突出优点是：O‑酰基化卡拉胶寡糖螯合亚铁能促进机体对铁的吸收利用，而且其中的卡拉胶寡糖成分还具有免疫增强作用和抗病毒活性。

技术领域：

本发明涉及生物医药和保健食品领域，具体涉及O-酰基卡拉胶寡糖螯合亚铁的制备方法。

背景技术：

寡糖是指由二到十个单糖单元通过糖苷键连接形成的直链或具支链的--类糖。这类糖进入大肠作为双歧杆菌的增殖因子，能有效地促进人体内有益细菌一一双歧杆菌的生长繁殖，抑制腐败菌生长，长期食用可减缓衰老、通便、抑菌、防癌、抗癌、减轻肝脏负担、提高营养吸收率，特别是对钙、铁、锌离子的吸收，改善乳制品中乳糖消化性和脂质代谢。

卡拉胶是一组硫酸化多糖，具有多种生物活性，能降低血清中低密度脂蛋白(LDL)和胆固醇，并可控制实验性动脉粥状硬化的形成；卡拉胶的降血脂作用较其他膳食纤维更明显，因其除了影响胆固醇的吸收外，还可通过形成凝胶吸收胆酸，从而造成胆酸减少，而机体利用胆固醇合成胆酸，使血脂减少；具有抗病毒活性，这种强负电荷硫酸聚阴离子与病毒或细胞表面正电荷分子结合，从而立体地抑制病毒对细胞的吸附；具有抗癌活性，它不是通过细胞毒作用，而是可能像其它多糖一样作为一种免疫促进剂，通过作用于某种靶细胞(如促进淋巴细胞的分裂)，并抑制生长调节因子的活性，间接地抑制肿瘤细胞的生长。但是，天然卡拉胶的分子量一般为几十万甚至上百万，如此高的分子量使它们很难通过机体不同的屏障，甚至细胞膜，从而使卡拉胶的生物活性不能得以充分发挥。将卡拉胶降解为小分子寡糖，并以二元有机酸的酸酐为酰化剂，通过二者之间的单酰化反应，在卡拉胶寡糖分子中引入羧基，增大其电荷密度。一方面使卡拉胶寡糖能够透过机体的屏障，另一方面可使其免疫增强作用和抗病毒活性提高。

铁对人体是相当重要的，铁元素在人体内参与着造血，并形成血红蛋白、肌红蛋白，参与氧的携带和运输的整个过程，铁还是多种酶的活性中心。当机体对铁的需求与供给失衡，导致体内贮存铁耗尽，继之红细胞内铁缺乏，最终引起缺铁性贫血。患铁缺乏症主要和下列因素相关：婴幼儿辅食添加不足、青少年偏食、妇女月经量过多/多次妊娠/哺乳及某些病理因素(如胃大部切除、慢性失血、慢性腹泻、萎缩性胃炎和钩虫感染等)等。还有有实验证明，缺铁会让中性白细胞的杀菌能力降低，使得淋巴细胞功能受损。缺铁性贫血可通过服用补铁剂进行治疗。亚铁盐类补铁剂口感差，对肠胃刺激大，容易引起胃黏膜受损、恶心、腹泻、便秘等副作用。

发明内容：

为克服现有产品的缺陷，本发明提供一种O-酰基化卡拉胶寡糖螯合亚铁的制备方法，以期为人们提供一种高效的补铁产品。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

所述卡拉胶寡糖由任意类型卡拉胶经酸降解而获得，具体步骤为：将卡拉胶溶于0.1M盐酸中，于60℃-80℃加热1-5小时后，用0.1M NaOH中和，溶液在蒸馏水中透析6天，经微孔膜(GS，0.45μm)过滤，在真空条件下浓缩至小体积。于4℃将浓缩液通过一个732型(H⁺)阳离子交换树脂柱(30ml)，再用TBA将该溶液pH调至8，冷冻干燥得到卡拉胶寡糖的TBA盐。于真空条件、40℃将其TBA盐进一步干燥24小时。

所述O-酰基卡拉胶寡糖衍生物由卡拉胶寡糖与二元有机酸的酸酐经单酰化反应获得，具体步骤为：将卡拉胶寡糖的TBA盐溶于DMF中，通入氮气，向溶液中顺序加入4-二甲氨基吡啶、二元有机酸的酸酐和三丁胺。将反应混合物加热到60℃-100℃，并使反应持续6-10小时，然后将混合物在冰水浴中冷却至4℃，将冷的饱和醋酸钠的乙醇溶液加入到该溶液中，维持4℃达1-4小时。离心沉降，沉淀物用无水乙醇洗涤3次，再将其溶于蒸馏水中，将该溶液在5％的NaHCO₃水溶液中透析两天，再在蒸馏水中透析4天。将透析后的溶液冷冻干燥，得到O-酰基卡拉胶寡糖。