[发明专利]EV71疫苗制备方法及通过该方法制备的疫苗在审
| 申请号： | 201811476812.8 | 申请日： | 2018-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN109666691A | 公开（公告）日： | 2019-04-23 |
| 发明（设计）人： | 周晨亮;江元翔;杨志建;张梦华;魏健;曾宪放;刘革;史力 | 申请（专利权）人： | 上海泽润生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/41;C12N1/19;C07K14/085;A61K39/125;A61K39/39;A61P31/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 疫苗 病毒样颗粒疫苗 密码子优化 毕赤酵母 表达体系 免疫原性 疫苗制备 共表达 启动子 蛋白 | ||
1.一种制备EV71重组病毒样颗粒的方法，该方法包括将EV71病毒P1前体蛋白编码基因与3C蛋白酶编码基因克隆至毕赤酵母表达载体中，双表达后得到形态均一稳定且具有免疫原性的病毒样颗粒，其中所述P1前体蛋白编码基因的序列为SEQ ID NO:5，3C蛋白酶编码基因的序列为SEQ ID NO:6。
2.权利要求1的方法，其中所述P1前体蛋白编码基因与3C蛋白酶编码基因通过同一表达载体克隆至毕赤酵母表达载体中。
3.权利要求2的方法，其中所述同一表达载体包含不同强度的启动子。
4.权利要求3的方法，其中所述P1前体蛋白编码基因的表达载体为在pPICZαB载体的BstBI/KpnI位点插入SEQ ID NO:5所构成的重组载体，所述3C蛋白酶编码基因的表达载体为在pPICZαB载体的BstBI/KpnI位点插入SEQ ID NO:6并将pAOX1启动子替换为pPEX8启动子所构成的重组载体。
5.通过前述权利要求任一项的方法制备的EV71重组病毒样颗粒。
6.一种疫苗，其包含权利要求5的EV71重组病毒样颗粒。
7.权利要求6的疫苗，还包含氢氧化铝佐剂。
8.权利要求5的EV71重组病毒样颗粒作为疫苗的用途。
9.一种DNA分子，其核苷酸序列为SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6。
10.一种重组载体，为包含权利要求9的核苷酸序列的pPICZαB载体。
11.权利要求10的重组载体，其中pAOX1启动子被替换为pPEX8启动子。
12.包含权利要求10或11的重组载体的毕赤酵母细胞。
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