[发明专利]一种重结晶无树脂残留的银杏内酯B制备方法

说明书

本发明公开了一种重结晶无树脂残留的银杏内酯B制备方法，采用高速逆流萃取、柱层析分离、重结晶相结合的方法，不但可除去银杏叶粗提物中的烷基酚酸类等多种有害杂质，而且，提高了银杏内酯B的收率，提高了产品的含量，达到十分理想的分离纯化目的，且适于工业化生产。

技术领域

本发明涉及植物提取物制备技术领域，特别涉及一种从银杏叶或 银杏叶提取物中提取药物有效成分银杏内酯B的制备方法。

背景技术

银杏(GinkgohilobaL.)为银杏科银杏属植物。随着国内外对银 杏叶的研究不断深入，发现银杏叶中含有银杏内酯A、B、C，银杏黄 酮和其他杂质等多种组分，而银杏叶中有效成分银杏内酯B为一种高 效的血小板活化因子拮抗剂，具有独特的药理作用和治疗价值，可用 以治疗中风、休克、移植排拆、血液透析、哮喘等疾病，引起了世界 范围制药工业的极大兴趣。在银杏内酯B的生产过程中，最关键的步 骤是分离提纯。

目前，生产银杏内酯B，一种方法是经过多步分离得到含量较高 的产品，这些分离过程包括浸提、过滤、萃取、沉淀等粗提过程，在 粗提物中仍有不少杂质；另一种方法是采用树脂柱层析、三氧化二铝 柱层析法，树脂柱层析是药物与食品工业中常采用的精制手段，这种 设备简单，设备一次投资低，这种方法的不足之处在于分离的效率较 低，流动相和固定相的利用率较低，成本高，产量低，产品含量和收 率之间的矛盾在柱层析中难以兼顾，要保持含量，只有牺牲收率，这 种低收率必将导致高成本；还有一种是采用模拟移动床色谱和重结晶 有机结合的方法通过萃取、模拟移动床纯化、重结晶得到成品，该方 法收率高(约1.5％)、提取率高(60％以上)、含量高，但是难以实现 工业化生产。

发明内容

本发明的目的是在于提供一种从银杏叶或银杏叶提取物中提取 银杏内酯B的制备方法。本发明方法简单易行，成本低，收率高，无 树脂残留，得到的银杏内酯B含量达95％以上，收率为2％以上。

本发明提供的银杏内酯B的制备方法包括以下步骤：

一、原料的选择及处理：

1、银杏浸膏(总黄酮24％、总内酯6％，15-25婆美度)；

2、银杏提取物(粉末：总黄酮24％、总内酯6％)，用适量(1-2 倍体积)纯净水溶解后，待用；

3、新鲜、干燥的银杏绿叶，烘干，温度控制在70℃，去杂、粉 碎，过60目筛，用60％乙醇提取2次，每次60-90分钟，合并提取液， 减压浓缩，回收乙醇；浓缩液加2倍的水，沉淀24小时，离心，取 上清液上HP-20吸附柱，先用水冲洗，然后用80％乙醇洗脱，收集洗 脱液，浓缩。

二、高速逆流萃取：

1)将银杏浸膏或浓缩后的提取液导入萃取塔内，从塔底均匀加 入乙酸乙酯进行对流溶剂萃取，乙酸乙酯用量一般为药液的1.5～2.5 倍，循环次数为4～5次，不同塔体，分开收集；

2)将萃取后的乙酸乙酯进行回收，得到稠膏，浓缩至20-25婆 美度，65-70℃真空干燥、粉碎到90-100目，得到银杏内酯产品；

三、柱层析、重结晶：

1)将得到的银杏内酯，用75-85％乙醇溶解后，通过80-120目的 聚酰胺柱，收集流出液；

2)将流出液再通过型号为HP-20的大孔树脂柱，然后，用去离 子水清洗树脂至流出液体为无色，再用浓度为75-85％的乙醇溶液洗 脱，当流出液颜色接近无色时，停止洗脱，收集洗脱液，浓缩至20-25 婆美度的浸膏；

3)将浸膏置于4℃以下环境冷藏，静置后，逐渐有晶体析出，3 小时后，收集结晶，抽滤，再用75-85％乙醇溶解结晶，重结晶，重结 晶两次后，将白色沉淀真空烘干至恒重，得银杏内酯B产品，含量可 达95％以上。