[发明专利]一种检测头孢克肟相关杂质的方法

说明书

本发明公开了从头孢克肟药物中检测头孢克肟相关杂质的方法，采用高效液相色谱的方法同时对头孢克肟杂质A、头孢克肟杂质B、头孢克肟杂质D和头孢克肟杂质E进行定性或/和定量检测。采用本发明的方法能够一次性有效检测原料药中的头孢克肟杂质A、头孢克肟杂质B、头孢克肟杂质D和头孢克肟杂质E，适用剂型范围广，杂质检出能力优异、含量准确。

技术领域

本发明涉及检测方法领域，特别是涉及药物中检测杂质的方法。

背景技术

头孢克肟是第三代口服头孢菌素，关于其原料及其制剂杂质的检测，各国药典收载的标准方法以及杂质控制限度，各国药典色谱条件相似：流动相均为四丁基氢氧化铵溶液和乙腈按一定比例配制的溶液，均采用HPLC-UV检测，波长均为254nm；均采用C18色谱柱。除欧洲药典采用流动相作稀释液外，其余药典采用pH7.0的磷酸或磷酸盐缓冲液作稀释液。日本药典和美国药典标准采用面积归一化法计算，其余均采用自身对照法计算。

通过药典收载情况及文献调研得知，头孢克肟有5个已知杂质，分别为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D和杂质E。其中杂质A、B、D既为工艺杂质，又为降解杂质，在原料合成、制剂工艺以及贮藏过程中均可产生；杂质C为工艺副产物，仅在原料合成过程中产生，在储存过程中不会增长；杂质E为降解杂质，在贮藏过程中可能产生。因此，头孢克肟降解杂质A、B、D、E的含量应为关注的重点。

由于各国药典对头孢克肟原料及制剂的杂质分析方法相似，因此，我公司最初在中国药典的色谱条件的基础上建立了适用于本品有关物质检测的方法，见表1。在实际检测时发现，在该色谱条件下，杂质A峰形较差(见图1)，杂质A呈三个峰，保留时间为17.208min、18.258min、19.989min，不能准确统计峰面积。通过对杂质进一步研究发现，杂质A和杂质B均为混合物，且校正因子并不在0.9～1.1范围内，但各国药典收载的标准方法中无一采用加入校正因子的计算方法。采用中国药典色谱方法对自制制剂中试样品进行放行。由于自制产品中，降解杂质A和B的含量均远小于限度1.0％，不加校正因子的计算方式对其影响较小。但在稳定性考察期间，杂质A和杂质B均呈现逐渐增长的趋势。可见，对于头孢克肟类药物中相关杂质的检测方法还需进一步探索优化。

表1本公司检测有关物质原方法

发明内容

本发明提供了一种检测头孢克肟相关杂质的方法，能够准确测定头孢克肟杂质A的含量，同时还能够成功将主峰、头孢克肟杂质A、头孢克肟杂质B、头孢克肟杂质D和头孢克肟杂质E有效分离，分离度符合规定，杂质A为单峰。

具体的，本发明提供一种检测头孢克肟相关杂质的方法，其特征在于，采用高效液相色谱同时进行定性或/和定量检测头孢克肟相关杂质，液相色谱的检测条件包括：

色谱柱：烷基键合硅胶柱，进一步选自C18色谱柱；

流动相：水相、有机相；

其中，水相为四丁基氢氧化铵溶液；有机相选自乙腈或/和甲醇，不单独为甲醇；流动相采用如表2所示下梯度洗脱程序：

表2