[发明专利]一种甘油激酶的制备方法在审
| 申请号： | 201811346370.5 | 申请日： | 2018-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN109207453A | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 谢渊;罗漫杰;杨广宇 | 申请（专利权）人： | 武汉瀚海新酶生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘油激酶 制备 发酵罐培养 接种 摇瓶发酵培养基 乳糖 发酵培养条件 葡萄糖 工作基础 乳糖诱导 条件培养 摇床培养 医疗试剂 种子菌种 工程菌 接种量 自然菌 甘油 试管 产酶 质控 发酵 诱导 消耗 保存 检测 开发 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种甘油激酶的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、发酵罐培养：首先将甘油保存菌接种于试管LB培养基中，在37℃，200r/min摇床培养10h-12h；
S2、按2％接种量再接种于摇瓶发酵培养基中，同样条件培养10h-12h作为种子菌种；
S3、发酵培养基装入300L发酵罐中，121℃灭菌30min，按2％接种量接入摇瓶培养的种子菌种液，均匀搅拌，溶氧保持20％进行发酵，间隔2-3h取样分析葡萄糖消耗量、生物量和pH变化；
S4、经检测葡萄糖被消耗至接近0开始诱导发酵，将发酵罐温度降到25℃，加入乳糖使终浓度达6.0g/L开始诱导发酵，间隔2-3h取样分析，当生物量基本恒定时停止发酵，从而完成了对甘油激酶的制备。
2.根据权利要求1所述的一种甘油激酶的制备方法，其特征在于，所述S3中发酵罐培养温度为35℃-37℃，搅拌速率为200r/min。
3.根据权利要求1所述的一种甘油激酶的制备方法，其特征在于，所述S3中发酵罐的消毒部件包含空气分布器、管内壁、顶板放零件的小间隙，发酵罐外壁、底板、顶板通过柔性布料擦干净。
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