[发明专利]一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法在审
申请号: | 201811341621.0 | 申请日: | 2018-11-12 |
公开(公告)号: | CN109430045A | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 别同德;赵仁慧;何华纲;蒋正宁;陈甜甜;王玲;高德荣;张勇 | 申请(专利权)人: | 江苏里下河地区农业科学研究所 |
主分类号: | A01H1/02 | 分类号: | A01H1/02;A01H1/06;C12Q1/18 |
代理公司: | 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 | 代理人: | 冯燕平 |
地址: | 225007 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 突变体 嵌合 诱变 小麦抗白粉病基因 白粉病 杂交种子 白粉菌 筛选 培养皿 杂交种 甲基磺酸乙酯 抗白粉病小麦 作物遗传育种 磷酸缓冲液 突变体筛选 自来水冲洗 功能研究 基因克隆 接种鉴定 条状分布 温室大棚 小麦品种 重要意义 叶脉 成株期 孢子堆 减小 露白 种植 研究 | ||
1.一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,首先将抗白粉病小麦品种和感白粉病小麦品种的杂交,再利用化学诱变剂但不限于甲基磺酸乙酯对杂交种子进行诱变,诱变剂的量为但不限于0.8%EMS磷酸缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将抗白粉病小麦品种与感白粉病小麦品种杂交,收获杂交种子;
(2)用化学诱变剂处理杂交种子,进而用自来水冲洗,直至在培养皿中露白;
(3)将露白后的杂交种子种到温室大棚中生长形成M1代诱变群体,同时种植的还有抗白粉病亲本、感白粉病亲本及和未诱变处理的F1植株作为对照;
(4)在成株期利用白粉病孢子在大棚内播撒接种;
(5)当感白粉病亲本充分发病后,分单株考察发病情况;
(6)嵌合体的分类,分为高度嵌合型突变体、低度嵌合型突变体、中度嵌合型突变体;
(7)将出现嵌合型突变的茎蘖的穗子收获后,在下一代(M2)种成穗行,大棚内种植模式同上一代;苗期进行白粉菌接种,筛选感白粉病但抗病基因标记阳性的小麦单株。
3.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,步骤(2)中所述化学诱变剂为甲基磺酸乙酯,诱变剂的量为但不限于0.8%EMS磷酸缓冲液。
4.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,步骤(2)中诱变时间为8小时。
5.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,步骤(5)中所述的发病情况植株确认如下:
当某个单株的某个茎蘖叶片上出现沿叶脉方向的条状白粉病孢子堆,而其它茎蘖叶片均表现正常抗病性状时,确定该单株是抗病和感病性状嵌合的突变体;此时,感病亲本的叶片上白粉菌孢子堆呈无规则散点状分布于全部叶片,抗病亲本和正常F1单株的叶片上不出现白粉菌孢子堆。
6.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,步骤(6)中所述高度嵌合型突变体表现为条状白粉病孢子堆宽度大于1/4叶宽;所述低度嵌合型突变体表现为条状白粉病孢子堆宽度小于1/6叶片宽度;所述中度嵌合型突变体表现为条状白粉病孢子堆宽度介于1/4和1/6之间。
7.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,步骤(7)中所述筛选感白粉病的小麦单株的方法为:
利用抗白粉病基因紧密连锁标记或功能标记鉴定,如果是小麦遗传背景内不交换的野生物种染色体,则用抗病基因所在外源染色体专化性标记对感病单株的DNA进行鉴定,当标记显示阳性时,说明该单株为携带了丧失抗白粉病功能的感病突变体。
8.根据权利要求2所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,在诱变当代(M1)植株的同一张叶片上即可观察到抗病和感病嵌合症状,表现为白粉菌孢子堆在叶片上延叶脉方向呈条状分布。
9.根据权利要求7所述的一种嵌合型小麦抗白粉病基因突变体的创制方法,其特征在于,抗病基因为显性遗传。
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