[发明专利]一种银杏叶黄酮的提取方法

说明书

本发明涉及银杏叶黄酮的提取方法，属于天然产物提取技术领域。包括如下步骤：取银杏叶，粉碎，加水和菠萝蛋白酶，进行酶解，再进行灭酶之后，得到酶解液；将酶解液用石油醚萃取，取有机相；在有机相中加入等重量的聚乙二醇的低浓度水溶液中，搅拌均匀，进行萃取，取水相；将水相送入超滤膜进行过滤，再将超滤膜的渗透液用正渗透膜进行浓缩，再进行干燥之后，得到银杏叶黄酮。本发明通过对银杏叶进行酶解之后，可以有效地使黄酮类进行释放。

技术领域

本发明涉及一种银杏叶黄酮的提取方法，属于天然产物提取技术领域。

背景技术

黄酮类化合物是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方起着重要的作用。

黄酮类化合物除少数游离外，大多与糖结合成苷。糖基多连在C8或C6位置上，连接的糖有单糖（葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等），双糖（槐糖、龙胆二糖、芸香糖等）、叁糖（龙胆三糖、槐三糖等）与酰化糖（2-乙酰葡萄糖、吗啡酰葡萄糖等）黄酮类化合物多为结晶性固体，少数为无定型粉末。 黄酮苷元一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂，易溶于稀碱液。黄酮类化合物的羟基糖苷化后，水溶性相应加大，而在有机溶剂中的溶解度相应减少。黄酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶剂，难溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有机溶剂。黄酮类化合物因分子中多有酚羟基而呈酸性，故可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。有些黄酮类化合物在紫外光（254nm或365nm）下呈不同颜色的荧光，氨蒸汽或碳酸钠溶液处理后荧光更为明显。多数黄酮类化合物可与铝盐、镁盐、铅盐或锆盐生成有色的络合物。

银杏系银杏科银杏属落叶乔木，银杏叶中含有多种生理活性成分，其中黄酮类化合物是重要的生理活性物质，具有保肝护肝、预防治疗心血管疾病、抗氧化、抗衰老等作用。因此， 将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。银杏叶黄酮类化合物的提取方法目前研究的有水浸取法，成本低但浸取率低；有机溶剂浸取法中，乙醇浸取的效率高且无毒，是目前采用较多的方法； 韩玉谦等采用超临界流体萃取法， 在70%乙醇溶液中加热回流法和 CO₂ 超临界流体萃取法提取银杏叶中的活性成分，银杏黄酮回收率为84.4 % ，是常规萃取法回收率的2倍多； 乙醇超声波浸取法, 黄酮提取率可达到 8 6.7 %。银杏黄酮含量的测定常用分光光度法和高效液相色谱法。分光光度法自20世纪 9 0年代以来一直是用来测定银杏黄酮的一种重要方法, 由于其成本低、便于操作等特点, 是一种快捷有效的方法。

发明内容

本发明的目的是：提供一种收率高的银杏叶黄酮的提取方法。

技术方案：

一种银杏叶黄酮的提取方法，包括如下步骤：

S1、按重量份计，取银杏叶片100～150份，粉碎，加水200～400份和菠萝蛋白酶3～5份，进行酶解，再进行灭酶之后，得到酶解液；

S2、将酶解液的pH调节至4～6之后，用石油醚萃取，取有机相；

S3、在有机相中加入等重量的1～3wt.%的聚乙二醇的低浓度水溶液中，搅拌均匀，进行萃取，取水相；

S4、将水相送入超滤膜进行过滤，再将超滤膜的渗透液用正渗透膜进行浓缩，再进行干燥之后，得到银杏叶黄酮。

优选的，S1中粉碎后的银杏叶片的粒度是20～40目。

优选的，S1中酶解的温度是50～60℃。

优选的，S4中的超滤膜的截留分子量是50000～100000Da。