[发明专利]一种高纯度肝素季铵盐的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种高纯度肝素季铵盐的制备方法及其应用，具体步骤为：将普通肝素和过量季铵盐分别溶于水相中，再混合反应，制得肝素苄索氯铵盐，过滤分离后将肝素苄索氯铵盐溶解于可与水互溶的有机相中，然后向其中加入纯化水，逐渐使肝素苄索氯铵盐在混合溶液中析出，过滤分离后干燥，得到高纯度肝素苄索氯铵盐，使用高纯度的肝素苄索氯铵盐制备依诺肝素钠，可稳定地控制依诺肝素钠生产的批间差异，同时控制杂质的产生，减少精制步骤，提高依诺肝素钠成品质量的同时，提高收率，最终成品依诺肝素钠完全符合欧洲药典和美国药典对依诺肝素钠原料药及其制剂的质量要求。

技术领域

本发明涉及化工领域，具体为一种高纯度肝素季铵盐的制备方法及其应用。

背景技术

自二十世纪三十年代起，普通肝素(UFH)就被用于血栓的预防和治疗。普通肝素是不同长度和分子量的硫酸粘多糖的混合物。随着分子大小的不同，其抗凝效果和药理学特性也有所差异。肝素主要来自于猪的小肠以及牛的肺组织。

低分子肝素(low-molecular-weight heparin，LMWH)是一类以普通肝素为起始物料经过分级或降解而得到的具有较低分子量的低聚糖混合物，它具有抗Xa活性，可抑制体内、体外血栓和动静脉血栓的形成，但不影响血小板聚集和纤维蛋白原与血小板的结合。低分子肝素最早于八十年代在欧洲应用于临床，由于在临床使用中具有比较明显的优势，如临床应用出血风险比普通肝素更低，LMWHs逐渐取代了普通肝素的很多适应症，成为治疗或预防急性静脉血栓、急性冠脉综合症(心绞痛、心肌梗塞)等疾病的首选药物。

通过不同的解聚方法制成的不同品种的LMWHs，其药物动力学特性和抗凝活性有不同程度的差异，适应症也各不相同，在临床上不能相互代替，因此每种产品都可被认为是独一无二的。目前世界各地在用的LMWHs有：依诺肝素钠(enoxaparin),达肝素钠(dalteparin), 那屈肝素钙(nadroparin),亭扎肝素钠(tinzaparin),舍托肝素钠(certoparin),瑞肝素钠(reviparin)，帕肝素钠(parnaparin) 以及贝米肝素钠(bemiparin)等。

欧洲药典对依诺肝素钠制备方法简要描述为：依诺肝素钠是一种低分子肝素钠盐，它通过对猪肠黏膜肝素的苄基酯衍生物进行碱解聚而获得。专利US5389618即采用这种碱解聚的β-消除法，其基本步骤为：以猪小肠粘膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯制备、对肝素苄酯进行碱解聚，以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。

肝素苄索氯铵盐是生产依诺肝素钠的关键中间体，US5389618等文献中关于肝素苄索氯铵盐中间体的特征和制备过程表述不尽详细，而且研究显示，苄索氯铵和其它杂质会影响进一步的酯化和解聚反应，使得依诺肝素钠生产批间差异较大，终产品着色严重，纯化困难，收率低。因此，如何获得高纯度并有明显特征的肝素苄索氯铵盐，是依诺肝素钠生产工艺的关键问题。

发明内容

针对背景技术中存在的问题，本发明提供了一种高纯度肝素季铵盐的制备方法，旨在获得高纯度肝素苄索氯铵盐，用于依诺肝素钠的制备或其他用途。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案，包括以下步骤：. 一种高纯度肝素季铵盐的制备方法，以肝素和季铵盐为原料，制得高纯度肝素季铵盐，以高纯度肝素苄索氯铵盐为原料进行酯化反应得到肝素苄酯。

作为本发明一种优选的技术方案，包括以下步骤：①、将肝素和苄索氯铵按一定比例各溶解于纯化水中，再将两种溶液混合，使肝素和苄索氯铵在水相中反应，肝素苄索氯铵盐从水相中大量析出，将沉淀分离后溶于适量的能与水互溶的有机溶媒中，至样品全部溶解；

②、搅拌步骤①所得溶液中，并加入适量的纯化水，肝素苄索氯铵盐将再次析出，将固相沉淀物与液相混合溶剂分离；

③、检测肝素苄索氯铵盐中游离苄索氯铵的含量，再将肝素苄索氯铵盐减压干燥，得到高纯度的肝素苄索氯铵盐，用于制备依诺肝素钠；