[发明专利]检测阿尔茨海默症标志物的拉曼生物传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种检测阿尔茨海默症标志物的拉曼生物传感器，其特征在于，包括两条适配体DNA、金纳米粒子、均相反应液；

所述的两条适配体DNA序列分别是：

PolyA10-Tau aptamer，其序列如SEQ ID No:1所示；

PolyA10-Aβ1-42 aptamer，其序列如SEQ ID No:2所示；

所述的均相反应液为：1*PBS、目标物以及事先标记好目标物对应的各自DNA适配体的AuNPs；所述的均相反应液中1*PBS 的NaCl终浓度为77.5 mM；所述的目标物为：tau蛋白或/和Aβ1-42低聚体。

2.一种权利要求1所述的拉曼生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将两条适配体DNA各自修饰到金纳米粒子表面；

（2）将修饰后的的纳米金粒子与均相反应溶液混合；

（3）拉曼强度分析。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）的具体操作步骤如下：

S1 制备1 nM纳米金溶液，加入拉曼染料4-NTP和适配体DNA，混合均匀后，4 ℃下保存；

S2 搅拌条件下，按照1μL/min的速度将PB缓冲液滴加到步骤S1得到的溶液中，然后1μL/min的速度加入PBS缓冲液，加完后置于4℃保存；

S3 向步骤S2得到的溶液中加入灭菌水，离心，去除上清液；再加入灭菌水，离心，此过程重复两次，得到修饰后的纳米金浊液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中适配体DNA加入量为1 μM, 最终体系中的修饰好的纳米金浓度为0.3 nM，目标物tau蛋白的浓度为0 fM-10 nM，Aβ1-42低聚体的浓度为0 nM-30 nM。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中PBS加入量为使其中PB的浓度为10 mM，NaCl浓度为0.3 M，最终体系中NaCl终浓度为77.5 mM。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的S3中标记到纳米金上的DNA与AuNPs的摩尔比为150:1。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）的过程为：将修饰后的纳米金溶液与均相溶液混合，37 ℃水浴下反应。