[发明专利]一种具有防治仔猪腹泻功效的硫酸化朱砂七多糖产品及其应用

说明书

本发明公开了一种具有防治仔猪腹泻功效的硫酸化朱砂七多糖的制备方法。本发明采用氯磺酸‑吡啶法对朱砂七多糖(Polysaccharide from Polygonum ciliinerve，PCP)进行硫酸化修饰，通过正交试验筛选出最佳反应条件为氯磺酸︰吡啶为1︰8，反应温度95℃，反应时间1h，所得产物取代度和活性高，并以CCK‑8法结合RT‑PCR检测证实硫酸化朱砂七多糖(sulfated Polysaccharide from Polygonum ciliinerve，sPCP)能有效抑制猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus，TGEV)复制增殖，抑制大肠杆菌和志贺氏杆菌，并能提高免疫功能，且效果明显优于朱砂七多糖，并筛选出最佳给药方式和剂量。本发明能提高朱砂七多糖的抗病毒和免疫增强活性。

技术领域

本发明属于中药多糖结构改造技术领域，涉及一种中药多糖的硫酸化修饰方法，具体涉及一种具有防治仔猪腹泻功效的硫酸化朱砂七多糖产品及其应用。

背景技术

仔猪腹泻是一种典型的多因素性传染病，引起的病因主要有病毒性、细菌性和其他等，以哺乳仔猪腹泻和高死亡率为主要特征，在世界各地均有发生，给养殖场主造成巨大经济损失，严重威胁养猪业的健康发展。而猪传染性胃肠炎病毒就是导致仔猪腹泻的重要病原之一。为控制此病，兽医临床长期大量使用抗生素和化学药物，导致病原微生物耐药性的产生，药物残留严重，仔猪肠道菌群失调以及疗效低下等严重问题，所以研制安全有效的新药迫在眉睫。中药具有来源广、无残留、低毒副作用、不易导致耐药性等优点，已经成为目前的研究热点。

中药多糖是中药的主要活性成分之一，已有研究表明中药多糖具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗炎、抗氧化和免疫调节等多种生物活性，同时中药多糖为天然产物，具有来源广泛、低毒副作用、无残留和不产生耐药性等特点，成为了学者们的研究热点。研究发现，多糖的生物活性与其空间结构密切相关，天然多糖经硫酸化修饰后，空间结构发生改变，产生新的构象，可使其原有的抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、免疫增强等生物活性提高，尤其具有突出的抗病毒活性。

朱砂七(Polygonum ciliinerve，PC)为蓼科蓼属植物毛脉蓼的块根，在秦巴山区天然资源丰富，性凉，味苦、微涩，有小毒，具有清热解毒、活血凉血、止血止泻的功能，被广泛用于胃肠炎、扁桃体炎、菌痢、尿路感染等疾病的治疗。朱砂七多糖(Polysaccharidefrom Polygonum ciliinerve，PCP)是从朱砂七中提取分离出的多糖，为朱砂七主要活性成分，在抗病毒、抗氧化及抗肿瘤等方面具有重要的生物活性。结合文献和本研究团队前期工作表明，硫酸化修饰能显著提高中药多糖的生物活性。本发明首次对朱砂七多糖进行硫酸化修饰，建立并优化了硫酸化朱砂七多糖(sulfated Polysaccharide from Polygonumciliinerve，sPCP)的制备方法，发现硫酸化修饰能显著提高朱砂七多糖的抗病毒、抗菌和免疫增强活性。

发明内容

为了提高朱砂七多糖的生物活性，本发明提供了一种朱砂七多糖的硫酸化修饰方法，以期获得一种更有效的防治仔猪腹泻的产品。

一种具有防治仔猪腹泻功效的硫酸化朱砂七多糖的制备方法，以氯磺酸-吡啶法对朱砂七多糖进行硫酸化修饰，其特征在于，修饰条件为氯磺酸︰吡啶为1︰8，反应温度95℃，反应时间1h。并筛选出一种取代度为4.31的硫酸化朱砂七多糖产品。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.建立了硫酸化朱砂七多糖的制备方法，通过正交试验筛选出最佳反应条件。硫酸化朱砂七多糖的制备方法国内外均无报道，本发明提供的一种硫酸化朱砂七多糖制备方法以及筛选出的最佳条件可以填补国内外研究空白。

2.证明硫酸化修饰能显著提高朱砂七多糖的抗病毒活性，并筛选出最佳给药方式和剂量，其对病毒的抑制率可达87.9％，表明抗病毒活性强，且硫酸化朱砂七多糖的免疫增强活性也明显优于朱砂七多糖。为研制防治仔猪腹泻的新药提供材料和参考。