[发明专利]一种检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于，包括：

1)链霉亲和素包被的磁微粒；

2)生物素标记的肌酸激酶同工酶抗体；

3)吖啶酯标记的肌酸激酶同工酶抗体；

4)校准品与质控品；

所述校准品与质控品各含高、低两个浓度点。

2.根据权利要求1所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于，所述链霉亲和素包被的磁微粒中磁微粒与链霉亲和素质量比1：10-1：20。

3.根据权利要求1所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于，所述生物素标记的肌酸激酶同工酶抗体中肌酸激酶同工酶抗体与生物素摩尔比1：5-1：20。

4.根据权利要求1所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒，其特征在于，所述吖啶酯标记的肌酸激酶同工酶抗体中肌酸激酶同工酶抗体与吖啶酯摩尔比1：5-1：20。

5.一种权利要求1-4任意一项所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)链霉亲和素包被的磁微粒的制备

取磁微粒，用缓冲液清洗，然后稀释，添加链霉亲和素，37℃孵育18-24h后，置于磁分离架上分离磁珠，去上清，用缓冲液清洗，加入封闭液，37℃孵育18-24h后，置于磁分离架上分离磁珠，去上清，用缓冲液清洗，得到链霉亲和素包被的磁微粒；

2)生物素标记的肌酸激酶同工酶抗体的制备

取肌酸激酶同工酶抗体，用缓冲液置换肌酸激酶同工酶抗体保存液，然后用缓冲液稀释，添加生物素，37℃孵育2-4h进行标记，然后加入封闭液，37℃孵育2-4h，然后蛋白纯化仪纯化，收集蛋白峰值，得到生物素标记的肌酸激酶同工酶抗体；

3)吖啶酯标记的肌酸激酶同工酶抗体的制备

取肌酸激酶同工酶抗体，用缓冲液置换肌酸激酶同工酶抗体保存液，然后用缓冲液稀释，添加吖啶酯，37℃孵育2-4h进行标记，然后加入封闭液，37℃孵育2-4h，然后蛋白纯化仪纯化，收集蛋白峰值，得到吖啶酯标记的肌酸激酶同工酶抗体；

4)制备标准品；

5)制备质控品；

6)分装上述链霉亲和素包被的磁微粒、生物素标记的肌酸激酶同工酶抗体、吖啶酯标记的肌酸激酶同工酶抗体、校准品与质控品，组装成成品。

6.根据权利要求5所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述封闭液为含2-5％BSA的20mM PB缓冲液。

7.根据权利要求5所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述缓冲液为20mM PB缓冲液。

8.根据权利要求5所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤1)中稀释后的磁微粒的浓度为10mg/mL。

9.根据权利要求5所述的检测血清/血浆中肌酸激酶同工酶的化学发光定量检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤1)中制备的链霉亲和素包被的磁微粒用20mM PB缓冲液稀释至10mg/mL。