[发明专利]一种双荧光标记纳米材料的制备方法

权利要求书

1.一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)先将HP-β-CD溶于DMSO，再加入三乙胺，完全溶解混匀后，备用；CDI溶于DMSO，待其完全溶解后加入到上一步的溶液中；然后将混合液体在氮气保护下避光搅拌，向混合液体中加入等体积的预冷的乙醚，混匀产生沉淀后过滤，再将过滤得到的HP-β-CD-CDI样品溶解于DMSO，形成HP-β-CD-CDI的DMSO溶液；

(2)先将PEI溶于DMSO，再加入三乙胺，完全溶解混匀后，在氮气保护避光条件下，逐滴加入到HP-β-CD-CDI溶液中，缓慢滴注，持续时间在2h以上，然后搅拌过夜，得到HP-β-CD-PEI溶液；

(3)将HP-β-CD-PEI溶液置于透析袋中透析2天，将透析好的液体在冷冻干燥机中冷冻干燥2天，得到浅黄色絮状物HP-β-CD-PEI，备用；

(4)将EDC与罗丹明B溶于EMS缓冲液，活化2h，得到活化液；然后将HP-β-CD-PEI加入活化液，搅拌过夜；得到HP-β-CD-PEI-RhB溶液；

(5)将HP-β-CD-PEI-RhB溶液透析2天后冷冻干燥直至完全冻干，得到红褐色固体粉末HP-β-CD-PEI-RhB；

(6)将模型药物荧光素钠和HP-β-CD-PEI-RhB完全溶解于水中，经探针式超声仪处理，避光条件下室温搅拌，然后置于透析袋中透析2天，冷冻干燥后，得到双荧光标记纳米材料。

2.根据权利要求1所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，所述HP-β-CD与所述CDI的质量比为17:7。

3.根据权利要求2所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，所述HP-β-CD与所述PEI的质量比为51:49。

4.根据权利要求3所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，所述荧光素钠与所述HP-β-CD-PEI-RhB的摩尔比为3:1。

5.根据权利要求1所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，所述EMS缓冲液的pH为5.5，浓度为30mM。

6.根据权利要求5所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，所述EDC、罗丹明B与所述HP-β-CD-PEI的摩尔比为1:1:1。

7.根据权利要求1所述的一种双荧光标记纳米材料的制备方法，其特征在于，经探针式超声仪处理10min。

8.如权利要求1所述方法制备得到的双荧光标记纳米材料。